你好， SDS-PAGE跑电泳时，跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。 具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定，而且这个时间的要求不会很严格，也就是说对电压的要求不严。 我做这个试验时，师姐给我讲的是由80变到120~140即可 ...
分析：1 积层胶凝的慢就应该有问题，大概应该有10分钟就行了 看看你的配方是不是有问题，或者试剂有过期的，看看过硫酸铵吧（APS）这个最好现用现配 配方:5%浓缩胶制备（4ml）：取2.7ml去离子水，浓缩胶贮存液0.67mL， Tris-HCl 缓冲液（PH6.7）0.5mL， TEMED4.0μL, 10% 过硫酸胺0.0...
SDSPAGE染色一般要3min。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是在聚丙烯酰胺凝胶电泳中引用了SDS，是最常用的一种蛋白表达分析技术根据检体中蛋白质分子量大小的不同，使其在电泳胶中分离。SDS-PAGE实验步骤：1、组装胶板时检查封闭是否完全。否则跑出来的胶形状可能千奇百怪甚至无法电泳。2、灌胶...
上样缓冲液混合后进行变性，温度必须要超过95°，时间5—10min，如果没把握，可以处理10min。也有可能是漏胶，制胶时封胶要严，操作不熟练时可以多加一点，待聚合后用去离子水加入电泳槽内，看看是否会漏，如果不会把水倒掉，滤纸吸干后再加入凝胶。加样的问题，加样时注意不要刺破凝胶，以避免样品...
有一点我用别人的分离胶缓冲液的时候分离胶跑1小时就到头了用我自己配的要跑1个半小时不知道和条带颜色浅有没有关系条带形状是正常的结果一 题目 SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上面跑出来...
【实验】SDS-PAGE蛋白凝胶电泳的基本原理,操作方法,注意事项,制胶,上样,跑胶,观察,拍照,蛋白胶,保姆级教程, 视频播放量 62290、弹幕量 147、点赞数 1409、投硬币枚数 512、收藏人数 3019、转发人数 954, 视频作者 植物百科, 作者简介 一个实验型up,偶尔猎奇。,相
这次是80V跑了1h,然后改成100V跑了2h零5min的 以前跑过40min+1h40min的也几乎是这样 是应该再跑一段时间还是提前一些呢? 而且现在跑的条带特别模糊,是因为跑得时候发热太严重吗? 我试过一次恒流跑,30mA跑了三个多小时才跑到中间··· 如何能跑出别人那种条带清晰分明,并且低分子量也很清晰的条带呢?回复...
第二:把第一条strip放在成品胶(SDS-PAGE的那个胶)顶部,用琼脂(agarose)凝固了2个小时,然后再跑SDS-PAGE.跑前这块成品胶都好好的,但是跑完胶(2个小时)以后,成品胶就连同上面的strip一起被挤出了原来的槽子.有朋友说可能是跑胶的时候温度太高,让胶胀大了.我就把胶放在4度的冷冻室里面跑,但是成品胶还是被...
细菌的膜蛋白用TritonX-100抽提后,跑SDS-PAGE,结果一开始浓缩压不成一条直线,进入分离胶后出现拖尾现象,过夜染色,脱色后发现条带就花了. 相关知识点: 试题来源: 解析 根据我的经验猜测,SDS-PAGE跑得不好看多半是因为胶配的不好.聚合时间一定要充足,分离胶聚合1小时以上,积层胶要聚合2~3小时效果比较好.对于...