1. 电泳条件不适当: 电泳条件包括电压、电流、时间等,如果这些条件设置不合适,可能会导致蛋白质标记跑不开。例如,电压过低可能会导致蛋白质运动速度过慢,而电压过高可能会导致蛋白质降解或电泳胶过热。 2. 样品处理不当: 在进行SDS-PAGE电泳前,需要对样品进行适当的处理,如加热、加入SDS等。如果这些步骤操作不当,...
SDS-PAGE电泳条件不正确:如果电泳缓冲液的pH值不正确、离子浓度不正确或电流密度过高,都可能导致蛋白标...
蛋白酶变性:在 SDS-PAGE 过程中,SDS 可能导致蛋白质发生变性。某些蛋白酶在处理过程中可能失去其原有...
如果希望分子量大小不同的成分都能有效分离,可以考虑使用梯度胶,因为普通的胶可能由于其浓度不当而无法实现这一目标。
如果在sds-page实验中未能检测到蛋白条带,甚至没有marker条带,这通常表明sds-page胶存在某些问题。marker条带主要由不同分子量的蛋白构成,因此如果没有出现marker条带,很可能意味着胶本身存在问题。检查胶的制作过程是关键步骤。这包括仔细核对所有配胶试剂,如浓缩胶和分离胶的成分和比例。同时,确保...
上样缓冲液混合后进行变性,温度必须要超过95°,时间5—10min,如果没把握,可以处理10min。也有可能是漏胶,制胶时封胶要严,操作不熟练时可以多加一点,待聚合后用去离子水加入电泳槽内,看看是否会漏,如果不会把水倒掉,滤纸吸干后再加入凝胶。加样的问题,加样时注意不要刺破凝胶,以避免样品...
广告 sds-page蛋白上样缓冲液(1x)如何定量蛋白? 已经加蛋白缓冲液难定量,面溴酚蓝,绝部蛋白定量试剂测定吸光值都溴酚蓝干扰,准确定量.测测280试试,先测缓冲液,干扰再测 琼脂糖电泳没跑出条带的原因 点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。 紫外...
如果是连MK都没有,那么一般都是sds-page胶的问题。因为MK中一般含有从大到小多条分子量不一的蛋白,所以应该也不会是胶浓度的问题。要检查配胶的各种试剂,跑胶时的缓冲液等容易造成胶有问题的地方。