一般来说,在进行SDS-PAGE分离胶电泳时,电压的设定需要结合所用的胶的特性和泳道长度等因素来考虑,常见的电压范围是40-200V。具体可以参考以下设置:1. 分离胶(separating gel)电压一般设定在40-60V,以避免样品在堆积在样孔(well)附近而没有迁移的情况。2. 聚合胶(stacking gel)电压一般设定在...
我也在做SDS-PAGE电泳,我是稳压200V,电流开始设的是80mA,后来设的是100mA,可是它却一直在20-30之间,总是不高,全部跑完要4到5小时,这是为什么呢?我全都照书上说的做的,可是跑的时候却完全不是这样,书上说45分钟到1小时就可以跑完了。亲们有谁知道啊? 返回小木虫查看更多分享...
SDS-PAGE电压要看具体的电泳仪 一般来说是设置成恒压150V~200V 如果是恒压200V,对于两块0.75mm的胶来说,电流开始时为100mA,结束时应该为60mA 对于两块1.5mm的胶来说,开始时应为110mA,结束时为80mA
加样完毕,盖好上盖,连接电泳仪,打开电泳仪开关后,设置恒压80V(电压调80V,电流调最大)20min,样品中的溴酚蓝指示剂压缩成一条直线且到达分离胶后,调节恒压120V约1h 40min(或200V 30-40min),当溴酚蓝指示剂迁移到凝胶前沿时关闭电源停止电泳。从电泳装置上卸下玻璃板,用卡片剥下凝胶后切除一角以标注凝胶方...
对于Bio-Rad的标准电泳装置或类似电泳装置,低电压可以设置在80-100V,高电压可以设置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的电泳仪就可以满足要求,也可以采用碧云天的多功能电泳仪(带定时)(EEP102)。为了电泳方便起见,也可以采用整个SDS-PAGE过程恒压的方式,通常把电压设置在100V,然后设定定时时间为90-120分钟。设置定时...
SDS-PAGE的问题 下层是分离层,上层是浓缩层,上层(浓缩胶)是为了使加入的样品在进入下层(分离胶)之前能够很好的浓缩到一起,呈平直的线状,从而使分离效果更好.在注入下层后一般是用水封闭,意义是使下层(分离胶)的液面能够平整,如果不封闭液面,将导致分离胶与浓缩胶的结合处不平整,这样就会使样品进入分离胶的时...
【求助】SDS-PAGE电流为零?? 请各位帮哈忙,我在跑SDS-PAGE电泳时用的电压是120v,电流20mA ,跑了8个小时才跑了一半,然后我决定把电压调到150v,电流调到30mA,没有想到电泳的电流竟然变为 0 mA 啊!!!看来只能把它调到以前用的120v,20mA 了,但是电流还是 0 啊,是不是电流槽出问题了,因为我换了电泳仪也没...
SDS-PAGE的电流问题在跑电泳的时候,跑到分离胶是我将电流调节至20mA,起初还好,但跑了一半发现电流降到了13mA.以前最多也是在17至22mA之间波动.那是不是我的电泳仪坏了? 扫码下载作业帮搜索答疑一搜即得 答案解析 查看更多优质解析 解答一 举报 我一般只关注电压,电压不变就行,电压一般用80-120V 解析看不懂?
我一般只关注电压,电压不变就行,电压一般用80-120V
在SDS-PAGE中使用的凝胶是聚丙烯酰胺(polyacrylamide),使蛋白质呈线性化的试剂是SDS。因此得名SDS-PAGE。 一 SDS-PAGE的原理首先准备一套蛋白电泳设备,蛋白质样品和marker上样到凝胶孔中,设置电压,启动电泳程序。通常样本中会添加一种还原剂,如巯基乙醇或二硫苏糖醇(DTT)(在洗涤剂的存在下,如SDS),可以打开折叠...