“溴酚兰在酸性条件下颜色是黄色,可能和你样品的ph有关系,你可以稍微点一滴氢氧化钠在里面,就没有...
各位前辈,最近这两次Tricine-SDS-PAGE都在跑到一半时发现前沿溴酚兰变成黄色,而且是从中间位置响两边扩散,分析原因可能是pH降低,可为什么会降低呢?或者还是有别的原因?请各位指点~ 负极缓冲液:0.1M Tris, 0.1M Tricine,0.1% SDS,pH8.25(pH文献上说不用调,按照配方配就应该是,我照做了,也没测pH) 正极缓冲液...
2. 溴芬兰进入分离胶后约2h开始变黄 看了以前的帖子,分析原因可能是电泳缓冲液、凝胶缓冲液和上样缓冲液的pH不对,所以全部重新配的,而且全部一次性,没有重复利用,电泳时正负极间有气泡,说明电路的是通的(不过槽比较旧,接触不良,用皮筋儿勒住上盖就没事了),制胶用的胶条也撕掉了,这个因素也排除,我经验有限,...
pH的问题,溴酚蓝在不同pH下颜色不同
带跑到后面,出现有黄线。黄色应该是指示剂溴酚蓝的颜色【溴酚蓝pH变色范围3.0(黄色)~4.6(紫色)】,可能是因为凝胶不均匀造成了这样的现象,以及结果中下面的底线严重的波浪形。3 很直的蓝线,水蒸气 4 实验结果1(背景洗脱不完全)5 实验结果1 6 实验结果2(背景洗脱完全)7 感谢您的阅读收藏,谢谢!
2. 电泳后的凝胶用5~10倍体积固定液在室温下固定,酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄。蓝色全部消失后,继续固定5min。为防止凝胶破裂,在进行此步骤之前可将凝胶浸泡于含20%甲醇、30%甘油的溶液中过夜。 3. 将凝胶标记好方向后放在保鲜膜或玻璃纸上面,上...
我们可以说你是非常仔细的,把每件事都做得倾向于完美,跑胶直到溴酚蓝前沿非常平直的落在胶的最底部。你用去离子水冲洗凝胶,然后将其置于摇床震荡。在这天稍晚些时候你发现你忘了将凝胶放到染色缸里面。第二天染色结果就是上面的样子了。 注意分子量较小的蛋白从胶上弥散较快,而较大分子量的蛋白弥散很慢而能...
SDS-PAGE实验步骤试剂: 1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(Tris-HCl缓冲液(0.05mol/L,25℃)50ml 0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L盐酸混匀后,加水稀释至100ml)(pH6.8),5ml 50%甘油,2ml 10%的SDS,0.5ml巯基乙醇,1ml 1%溴酚蓝, 0.9ml蒸馏水。可在4℃保存数周,...
溴酚蓝也是pH 指示剂,当它移动到酸性区时(pH4 ),颜色会变成黄色。溴酚蓝的这个移动过程大体上发生在极性小分子的聚焦之后,蛋白质大分子聚焦之前。 6. 跑第一向时,为什么电压总达不到预定值? 当上样量比较大时或体系内盐分比较多时,聚焦的电压有可能达不到所设定的数值。