SDS-PAGE只能对蛋白含量的多少进行粗略的估计,不能计算出其准确的值,若要精确计算某个蛋白质的含量,需要将蛋白胶条中包含的蛋白质回收,利用其它技术如质谱技术进行后续精确鉴定。
2.严谨操作:SDS-PAGE测定分子量有误差,不可完全信任。有必要时,应同时作标准曲线。并且SDS—PAGE测定分子量有10%误差,不可完全信任。 3.注意个人安全:在实验过程中请注意个人安全,避免直接接触化学试剂。 以上就是用SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质含量的注意事项,如果您对实验步骤有疑问或者想了解更多信息...
总之,虽然SDS-PAGE电泳主要是一种定性分析工具,但在适当的方法和条件下,它可以提供相对的蛋白质含量信息。然而,为了获得更准确的结果,建议结合其他定量方法进行综合分析。
-, 视频播放量 41、弹幕量 0、点赞数 0、投硬币枚数 0、收藏人数 1、转发人数 0, 视频作者 waki酱呐, 作者简介 ,相关视频:离子交换层析-根据等电点分离纯化蛋白质的方法,等电点沉淀法——利用蛋白质等电点分离的方法,等电点聚焦电泳IEF-根据等电点分离纯化蛋白质,分子
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。聚丙烯酰胺凝胶是由一定量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合成的三维网状结构。SDS-PAGE一般采用不连续凝胶系统,即含有不同孔径的两层凝胶...
Tip:通过BCA分析法,分析牛奶中蛋白质的含量,在通过SDS-PAGE和Coomassie Blue染色观察蛋白质电脉冲结果的基础上,进行Western Blot,使membrane transfer,通过实验熟知利用抗原-抗体反应对特定蛋白质进行定量分析和检测的方法 实验方法 蛋白质定量分析法-BCA法
实验七 SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定 一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合...
将待测蛋白质的迁移率带入方程,即可计算得相对其分子量 2.方法/步骤 1 标准蛋白样品的制备:根据待测样品的理论分子量或根据其他参数选用适宜大小的蛋白质分子量标准。2 待测蛋白质样品的制备:取蛋白质样品加入等体积2×SDS-PAGE上样缓冲液,混匀,在沸水浴中加热3min。3 电泳分离与染色:当电泳前沿(溴酚蓝...
(1)标准蛋白质(低分子量Marker)蛋白质名称 分子量 兔磷酸化酶B 97400 牛血清白蛋白 66200 兔肌动蛋白 43000 牛碳酸肝酶 31000 胰蛋白酶抑制剂 20100 鸡蛋清溶菌酶 14400 待测蛋白质:牛血清白蛋白、人血清蛋白 (2)凝胶试剂 1)30%(W/V)丙烯酰胺30g丙烯酰胺,0.8g甲叉双丙烯酰胺,溶于100ml蒸馏水中,...
SDS-PAGE是一种根据分子量分离蛋白质的凝胶电泳分析技术。当蛋白质通过凝胶基质电泳分离时,较小分子量的蛋白质受到来自凝胶基质的阻力更小,电泳时迁移速度更快。影响蛋白质在凝胶基质中的迁移速率的其他因素还包括蛋白质的结构和电荷,在SDS-PAGE中,十二烷基硫酸钠(SDS,又称十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的使用...