蛋白质的纯度鉴定可通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法。利用SDS-PAGE电泳方法或毛细管电泳法(CE-SDS)提供了最简单、成本最低,并且在确定样品中蛋白质组分数目方面灵敏度最高的手段,因此最为常用。 SDS 凝胶电泳以及利用电泳测定分子质量和大小的方法 。这个方法都可以单独测定样品的纯度,方法的选择取决于希望检测待测蛋白质...
掌握蛋白类药物SDS-PAGE法检测分子量和纯度的原理和方法。二、实验原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。聚丙烯酰胺凝胶是由一定量的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合成的...
实验一SDS-PAGE凝胶电泳法测定蛋白质的纯度 [目的要求] 学习SDS-PAGE测定蛋白质纯度的原理和方法;掌握SDS-PAGE的其他应用 [原理] SDS-PAGE是PAGE的一种特殊形式,有关理论如上所述。 SDS是带负电荷的阴离子去污剂。用SDS-PAGE测定蛋白质分子量时,蛋白质需经样品溶解液处理。在样品溶解液中含有巯基乙醇及SDS,各种...
蛋白质经SDS-PAGE电泳后按分子量大小分离开来,如果蛋白样品只含有一种蛋白质,那么其电泳后只会显现一个唯一的蛋白条带;但如果一个蛋白样品中含有多种大小不同的蛋白,那么电泳后不同的蛋白质会被分离成大小不同的蛋白条带。于是,可以据此利用SDS-PAGE的分离作用进行蛋白纯度的鉴定,不仅可以分析一个未知蛋白样品...
SDS-PAGE判定蛋白质的纯度:若该蛋白质是单肽链蛋白质,则电泳得到的只有一条蛋白带(两条色带:一条为溴酚蓝,一条为蛋白带);若得出多条电泳带,则应该用非SDS-PAGE进行电泳,得出单一蛋白带则为单一蛋白质SDS-PAGE判... 分析总结。 若得出多条电泳带则应该用非sdspage进行电泳得出单一蛋白带则为单一蛋白质sdspag...
实验七 SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定 一、实验目的与原理 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时,它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现,如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS),大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合,即每克蛋白质结合1.4g的SDS-复合...
如果纯化的样品中只含有同一种蛋白质,蛋白质样品电泳后,则只显现一条蛋白条带。由此SDS-PAGE技术可以对蛋白质样品的纯度进行分析。SDS-PAGE分析原理 SDS是一种阴离子表面活性剂能打断蛋白质的氢键和疏水键,并按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白...
根据SDS-PAGE电泳的原理可知,SDS-PAGE可以间接判断蛋白质样品的纯度,将未知纯度的蛋白质样品进行SDS-PAGE凝胶电泳,观察电泳结束后产生的蛋白条带,若凝胶上有且仅有一个蛋白条带,则说明该蛋白样品只含有一种蛋白质;反之,若观察到不止一个分布不同的蛋白条带,则说明该蛋白样品含有除目标蛋白以外的其他蛋白质。
用于蛋白纯度及蛋白质亚基相对分子量(relativemolecularmass,Mr)测定。 SDS是一种阴离子去污剂,带有大量负电荷,与蛋白质结合后使蛋白质所带负电荷大大超过了天然蛋白质原有的负电荷,因而消除或掩盖了不同种类蛋白质间原有电荷的差异。SDS破坏蛋白质氢键、疏水键,引起蛋白质构象改变,使蛋白质-SDS复合物形状近似椭圆形...