本实验旨在利用SDS-PAGE技术对不同来源的蛋白质进行分离,并观察其分离效果。 材料与方法 1. 样品制备:收集不同来源的蛋白质样品,如动植物组织、细胞培养液等。 2. 样品处理:将样品加入SDS-PAGE样品缓冲液,并在100℃下煮沸5分钟,使蛋白质变性。 3. 准备SDS-PAGE凝胶:按照实验要求制备SDS-PAGE凝胶。 4. 样品...
聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide Gel Electrophoresis, PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质进行蛋白质或核酸分离的一种电泳方法。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺单体(acrylamide,简称ACR)和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺(N,N-methylene bisacrylsmide简称BIS)在催化剂的作用下聚合交联而成的三维网状结构的凝胶。通过改变单体...
一、实验目的: 1.1理解SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量的基本原理。 1.2掌握分子电泳的基本步骤,掌握计算蛋白质相对分子质量的方法。 二、实验内容和原理: 2.1电泳(electrophoresis):是指带电颗粒在电场中向着与它电性相反的电极移动的现象。许多重要的生物分子都含有可电离基团(如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等...
在垂直电泳装置上可进行连续电泳或不连续电泳。连续电泳仅有分离胶,整个电泳使用相同的缓冲系统,所以灌胶十分简便。不连续电泳则需要先灌注分离胶(均一胶或梯度胶),再灌注浓缩胶。按照配方在模具中灌注分离胶后,小心地在分离胶表面加一层水(或水饱和的异丙醇或正丁醇),封住胶面,以促使凝胶聚合并使凝胶表面平直。...
3、运用S D S PAGE测定蛋白质分子量及染色鉴定。三、实验原理、电泳带电颗粒在电场作用下 ,向着与其电荷相反得电极移动得现象。在一定得电场强度下 , 分子在凝胶介质中得迁移速率取决于分子得大 小、构型与带电量得大小 .2、 PAG E聚丙烯酰胺凝胶(P AG)就是由单体丙烯酰胺(Acr)与交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bi...
SDSPAGE测定蛋白质相对分子质量实验报告 实验报告:SDS测定蛋白质相对分子质量 一、实验目的: 通过SDS-技术测定蛋白质的相对分子质量。 二、实验原理: SDS-是一种常用的蛋白质电泳分离技术。在该技术中,蛋白质样品与SDS(十二烷基硫酸钠)和还原剂混合后,加热可以使蛋白质完全还原并且与SDS结合,形成具有负电荷的复合物...
通过SDS(十二烷基硫酸钠)的作用,可以使蛋白质在电泳过程中带有负电荷,从而使其按照分子量大小在凝胶上进行分离。本实验旨在通过SDS-PAGE技术分离和分析不同来源的蛋白质样品,探究其分子量和纯度。 材料与方法: 1. 样品制备:从不同来源(如细菌、植物、动物)获得蛋白质样品,并进行样品的提取和纯化。 2. SDS-PAGE...
1、实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE 别离蛋白质【实验目的】1. 了解和掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的技术和原理;2. 掌握用此法别离蛋白质组分的操作方法。【实验原理】 在生物化学、分子生物学和基因遗传工程实验中,常常要进行蛋白质和核酸的别离工作。聚丙烯 酰胺凝胶电泳Polyacrylamide Gel Electrophoresis, PAGE是以...
而SDS-PAGE 仅根据蛋白质亚基分子量的不同就可以分开蛋白 质。该技术最初由 shapiro 于 1967 年建立,他们发现在样品介质和 丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂(SDS 即十二烷基硫酸钠) 后,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小(可以忽 略电荷因素)。 二、实验目的 1.学习 SDS-PAGE 测定蛋白...
在SDS-PAGE凝胶中,样品中的蛋白质已经被分离,并得到个单独的带。通过与标准品分子量相比,可以确定分离得到的蛋白质的分子量。 实验结论: 1.随着电场强度的增加,蛋白质分子迁移距离会增加。 2.蛋白质分子迁移速度与其分子量成反比例关系。 3. SDS-PAGE可以实现对复杂混合物的蛋白质分析和鉴定,同时对单一蛋白质的...