在SDS-PAGE电泳过程中，有时我们会遇到条带拖尾和弥散的问题。这可能是由于样品处理不当或电泳条件不合适导致的。为了解决这些问题，我们需要仔细检查样品的处理过程，确保其符合要求，并调整电泳条件，如电压、电流和时间等，以获得更好的电泳效果。可能的原因：样品降解：蛋白质在制备过程中受到损伤，导致其分子量降低...
可能原因:样品浓度过高或过低,凝胶浓度不合适,电泳条件不合适。 解决方案:调整样品浓度,选择合适的凝胶浓度,并优化电泳条件,如电压、时间和温度。🌬️ 电泳条带出现拖尾 可能原因:样品中存在高分子量物质或聚集体,凝胶浓度过低,电泳时间过长。 解决方案:进行样品预处理,如离心或过滤,去除高分子量物质或聚集体,提...
SDS-PAGE问题及解决方法一:电泳跑的太慢 A.内槽缓冲液要没过凹玻璃板,低于平玻璃板。内槽和外槽缓冲液不能相通。B.电泳缓冲液pH值及浓度是否配制正确。C.分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液pH值及浓度是否配制正确。D.电压太低,选择合适的电压。E.样品盐浓度太大,除去样品中的盐。 二:微笑现象 .电泳温度太高...
在SDS-PAGE电泳结束后，有时会观察到条带出现拖尾和弥散现象。这可能是由于样品中蛋白质的分子量接近凝胶的筛分范围所致。此外，电极缓冲液离子强度不足、凝胶老化、电泳条件控制不当等因素也可能导致此现象。为了解决这一问题，可以尝试调整电泳条件、更换新鲜电极缓冲液、使用适宜浓度的分离胶等方法。可能的原因：样品...
SDS-PAGE常见问题与解决方法 一.凝胶问题 1. 胶的凝结不好,例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下,在分离胶的下部有波浪样的花纹,凝胶不均匀。 解决方法:加大TEMED 和过硫酸胺的量,使其凝结速度加快。同时洗干净玻璃板,防止有残留的胶干结在玻璃板上。 2. 胶不凝, 解决方法:温度较低时加大TEMED...
对于蛋白纯化中SDS-PAGE跑胶问题,小编是有发言权的。对于当时还是蛋白纯化小白的小编来说,这个 “坑”反复跳了半学期才逐渐发现问题(哭死~)。为什么这么久才发现,一方面自己做实验反应较迟钝,另一方面网上也没有一个说明白的,只能从网络夹缝中查到那么一点点看上去合理的信息。那么,话不多说,上干货。
一、SDS-PAGE 凝胶制备 1、玻璃板梳子的清洁 先用自来水浸泡5分钟,洗洁精清洗,注意厚玻璃板两侧沟槽容易残留胶,可以用尖锐的东西轻刮,然后用自来水冲洗干净泡沫,再用纯水冲洗即可,37度烘干或者吹风筒吹干,注意别用热风长时间近距离吹,厚玻璃板两侧的边条是用粘胶粘在一起的,高热会使粘胶融化,久而久之可能引起密闭...
SDS-PAGE常见问题与解决方法 一.凝胶问题 1. 胶的凝结不好，例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下，在分离胶的下部有波浪样的花纹，凝胶不均匀。解决方法：加大TEMED 和过硫酸胺的量，使其凝结速度加快。同时洗干净玻璃板，防止有残留的胶干结在玻璃板上。2. 胶不凝，解决方法：温度较低时加大...
SDS PAGE 电泳 常见问题分析 1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响 在 SDS PAGE 不连续电泳中 制胶缓冲液使用的是 Tris HCL 缓冲系统 浓缩胶是 pH6.7 分离胶 pH8.9 而电泳缓冲液使用的 Tris 甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中 其 pH 环境呈弱酸性 因此甘氨酸解离很少 其在电场的作用下 泳动效率低 而 CL 离子却很高 ...
在 SDS-PAGE 不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是 Tris-HCL 缓冲系统,浓缩胶 是 pH6.7,分离胶 pH8.9;而电泳缓冲液使用的 Tris-甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其 pH 环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而 CL 离子却很高, 两者之间形成导电性较低的区带, 蛋白分子就介于二者之间泳动...