下面我们将介绍SDS-PAGE电泳试剂的配制方法。 聚丙烯酰胺凝胶电泳胶液配制 1. 将蒸馏水取2L,通过0.22μm的滤膜过滤3遍来除杂质,备用。 2. 将40%(w/v)丙烯酰胺10mL,在干燥器中烘干2小时,然后加入蒸馏水固定容积至50mL。将10%(w/v)N, N’-二甲基亚硫脲5mL加入均聚化溶液中,搅拌30分钟至完全溶解。 3. ...
SDS-PAGE凝胶电泳操作蛋白含量较低的酶制剂或原料样品1粉剂或颗粒样品称取样品1g加入35ml蒸馏水进行搅拌溶解1h搅拌时间可根据实际情况进行增减4000rpm离心10min取离心上清液等体积加入20的三氯乙酸聚沉30min离心弃去离心上清液用70的丙酮溶液洗涤沉淀4000rpm离心10min重复洗涤35次将丙酮洗涤液吹干加入适量13mlpbs溶解沉淀...
试剂:蛋白值样品,SDS-PAGE loading buffer,PBS,Tris-Hcl (PH 8.8), Tris-Hcl (PH 6.8) ,30%丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸,5×SDS-PAGE电泳缓冲液,考马斯亮蓝R-250染色液,脱色液、天能预制胶。 仪器耗材:垂直电泳槽,电泳仪,电泳仪电源,移液枪,移液枪tip吸头,离心管、试剂瓶。 实验步骤 一、凝胶配置 1...
SDS-PAGE凝胶电泳：将凝胶玻璃板固定于电极架，放入电泳槽中的固定架(小玻璃板朝内，卡紧；若只跑一块胶，槽的另一边垫一块塑料板)；在上下槽内加入1×电泳缓冲液(上槽内的电泳液应没过小玻璃板上缘3-5mm；下槽内的电泳液应没过金属丝，水位低于大玻璃板上缘3-5mm，内液高于外液，排除凝胶底部两块玻璃...
SDS-PAGE电泳相关溶液的配置5将凝胶小心取下放入容器中加入染色液用摇床摇23h6待条带清晰后倒出染色液加入脱色液过夜7将脱色液倒掉在灯箱下观察8用数码相机拍照分析 电泳相关溶液的配置: 1、30%丙稀酰胺混合溶液(100ml):称取29g丙稀酰胺和1gbis丙稀酰胺,用水溶解定容到100ml,过滤,4摄氏度保存一个月。 2、5×...
实验用品（溶液配制说明详见文章下方）蛋白样品，SDS-PAGE loading buffer，PBS，Tris-Hcl (PH 8.8)， Tris-Hcl (PH 6.8) ，30%丙烯酰胺，10%SDS，10%过硫酸，5×SDS-PAGE电泳缓冲液，考马斯亮蓝R-250染色液，脱色液。实验步骤一、凝胶配置1．分离胶的配制（1）找出配套的胶板，用擦镜纸擦干净，并固定...
-这是制备聚丙烯酰胺凝胶的基础溶液。 2. 响应稀释液(Response diluent) -用于稀释聚丙烯酰胺溶液以获得不同浓度的凝胶。 -可通过将聚丙烯酰胺溶液与水按1:3体积比混合来制备响应稀释液。 二、缓冲液配方: 1. 离子化追踪剂(Tris-Glycine running buffer) -用于凝胶电泳盒中电解质的运行。 -配方为: 3g Tris bas...
(9)供试品缓冲液称取三羟甲基氨基甲烷0.303g,溴酚蓝2mg、十二烷基硫酸钠0.8g,量取盐酸0.189ml、甘油4ml,加水溶解并稀释至10ml,此溶液适用于非还原性SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,如用于还原型的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,则再加β-巯基乙醇2ml。 (10)分子量标准供试品的分子量应包括在使用的分子量标准范围之内。 (11)...
以下是制作SDS-PAGE凝胶的基本配方和制胶步骤: 配方: 1. 1%丙烯酰胺(Acrylamide)溶液:将3.7g丙烯酰胺和60μl N,N'-亚甲基双丙烯酰胺溶解在0.5ml双蒸水中,搅拌均匀。 2. 2.5%BT(Bis-Tris)溶液:将0.1g BT和0.25ml TBE(三酸乙酸盐电泳缓冲液)混合均匀。 3. 10%过硫酸铵(AMS)溶液:将10μl AMS溶解在1...