当这种聚合物形成时,它会变成凝胶,我们将用电将蛋白质拉过凝胶,因此整个过程称为聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)。 聚丙烯酰胺凝胶是由穿过纤维网状结构的迷宫般的隧道构成(图 2 和图 3)。图 2. 展示了一块聚丙烯酰胺板(深灰色),其边缘暴露有隧道(不同大小的红色环带阴影以描绘深度)。凝胶中随机散布着许多...
SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量在5—250kDa之间的蛋白质。十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate ,SDS)和聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel ,PAG)组合使用可以消除结构和电荷的影响,从而仅根据分子量的差异来分离蛋白质。SDS-PAGE的特性:在一定浓度时,...
【实验目的】 1.了解和掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的技术和原理; 2.掌握用此法分离蛋白质组分的操作方法。 【实验原理】 在生物化学、分子生物学和基因(遗传)工程实验中,常常要进行蛋白质和核酸的分离工作。聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide Gel Electrophoresis, PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质进行蛋白质或核酸分离的...
一、实验目的 1. 学会SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法原理。2. 掌握用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质相对分子质量的操作技术 二、实验原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的一种区带电泳。该凝胶由丙烯酰胺(acr)和交联剂N, N-甲叉双丙烯聚酰胺(bis)聚合而成。聚丙烯酰胺凝胶电泳利用电泳和分子筛的...
一. 实验目的 1.学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理 学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理 SDS • 2.掌握垂直板电泳的操作方法 • 3.熟悉蛋白印迹技术原理和方法 二. 实验原理 • SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳:是在聚丙烯酰胺 凝胶系统中引进SDS(十二烷基磺酸钠) • 1967年,Shapiro等人首先发现,如果在聚丙烯酰...
实验十一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测 定蛋白质分子质量 一、目的要求 学习和掌握采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子质量的基本原理和方法。二、实验原理 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(Acr)和少量交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)在催化剂的作用下聚合交联形成的三围网状结构。通过改变单体Acr浓度或单体与...
一.实验目的 1.学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理。 2.掌握垂直板电泳的操作方法。 3.运用SDS-PAGE测定蛋白质分子量及染色鉴定。 二.实验原理 带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动,这种现象称为电泳。 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)单体和少量交联剂甲叉双丙烯酰胺(简称Bis)通过化学催化剂(过硫...
SDS-PAGE电泳实验步骤垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 一、实验目的 学习 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS—PAGE)测定蛋白质的分子量的原理和基本 操作技术。 二、实验原理 蛋白质是两性电解质,在一定的 pH 条件下解离而带电荷。当溶液的 pH 大于蛋白 质的等电点(pI)时,蛋白质本身带负电,在电场中将向正极...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定蛋白质分子量 一、实验目的:1.学习 SDS-PAGE分离蛋白质的原理; 2.学习垂直板电泳的操作方法。二、实验原理 1、电泳:(1)定义:是指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷 相反的电极方向移动的现象。 (2)影响电泳效果的因素:①带电颗粒的大小和形状:...