连续电泳仅有分离胶,整个电泳使用相同的缓冲系统,所以灌胶十分简便。不连续电泳则需要先灌注分离胶(均一胶或梯度胶),再灌注浓缩胶。按照配方在模具中灌注分离胶后,小心地在分离胶表面加一层水(或水饱和的异丙醇或正丁醇),封住胶面,以促使凝胶聚合并使凝胶表面平直。凝胶在30°C~40°C放置40分钟~1个小时后,可...
本次实验的目的在于学习聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,并掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白质的操作技术。 2材料和方法 2.1实验原理 2.1.1聚丙烯酰胺凝胶的性能及制备原理 2.1.1.1性能 聚丙烯酰胺凝胶的机械性能好,有弹性,透明,相对地化学稳定,对pH和温度变化比较稳定,在很多溶剂中不溶,是非离子型的,没有吸附和电渗...
因此蛋白质- SDS胶束在凝胶系统中,电泳迁移率不再受电荷影响,而主要取决于椭圆棒的长轴长度(即蛋白质的分子质量大小)。 电泳迁移率与分子质量的对数呈线性关系。 所以,通过SDS-PAGE蛋白电泳,可以实现蛋白按照分子量大小进行分离的最终效果。 影响电泳结果的因素—SDS 蛋白质与SDS的结合程度是SDS-PAGE电泳成功的关键之...
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)有圆盘(disc)和垂直板(vertical slab)型之分,但两者的原理完全相同。由于垂直板型具有板薄,冷却,分辨率高,操作简单,便于比较和扫描等优点,因而为大多数实验室采用。十二烷基硫酸钠(SDS)是一种阴离子表面活性剂,加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键、疏水键打开,并结合到蛋白质分子上(...
1、SDSPAGE蛋白电泳分析一、目的掌握SDS电泳原理与方法二、电泳原理聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂作用下,聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异及分子大小的不同所产生的不同迁移...
为了得到更全面得资料, 还必须用其它方法测定其分子量及分子 中肽链得数目等,与SDS-凝胶电泳得结果互相参照.九、实验结果误差分析及讨论本次试验主要就是让我们学习 SDS P A G E测定蛋白质分子量得原理、掌握垂直板电泳得操作方法、运用 SDSPAGE 测定蛋白 质分子量及染色鉴定 在老师得悉心指导下, 经过分组分工...
实验相对简单, 结果处理也比较简单,但由于我们小组在制胶时存在较大误差,导致实验结果并不理想,但 是后续的结果处理还是能测泄出我们组的蔗糖酶的分子虽大小。通过本次实验,我们掌握了凝胶电泳的作用原理以及 15、操作方法。八、术语表1. 凝胶:凝胶是指颗粒大小在1埃到10埃之间的混合物。高分子溶液和某些溶 胶...
实验9SDS-PAGE蛋白电泳分析报告.ppt,蛋白质的分离 聚丙烯酰胺(SDS)凝胶电泳法 一、实验目的 学习聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2)掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳的操作技术 二. 基本原理 (一) 电泳 电泳: 带电颗粒在电场的作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象. (二) 聚丙烯酰
SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)SDS-PAGE 的目的是根据蛋白质的大小而不是其他物理特征来分离蛋白质。为了理解这是如何工作的,我们必须理解名称的两半:SDS 和 PAGE。SDS 由于我们试图分离许多不同形状和大小的不同蛋白质分子,我们首先希望它们变性,以便蛋白质不再具有任何二级、三级或四级结构。分子的 3D 结构将...