在准备SDS-PAGE凝胶时,凝胶的浓度是指丙烯酰胺的总浓度,它决定了凝胶孔隙的大小,从而影响蛋白质的分离效果。浓度越高,孔隙越小,适合分离小分子量蛋白质;浓度越低,孔隙越大,适合分离大分子量蛋白质。 一、计算凝胶浓度的公式为: 凝胶总浓度 (T)=丙烯酰胺浓度+交联剂浓度凝胶总浓度 ...
(1)运行一个含有已知浓度蛋白标准的凝胶,以创建一个蛋白浓度与凝胶上条带颜色深浅(灰度值)之间的关系曲线。(2)通常使用由一系列不同浓度的蛋白标准制备的SDS-PAGE来创建这一标准曲线。2、样品条带的灰度分析:(1)使用适当的软件(例如ImageJ)来分析样品在SDS-PAGE图上的条带的灰度值。(2)...
表1:SDS-PAGE分离胶配方表 凝胶浓度 各组分名称 各种凝胶体积所对应的各种组分的取样量 5mL 10mL 15mL 20mL 25mL 30mL 40mL 50mL 6% Gel H2O 2.6 5.3 7.9 10.6 13.2 15.9 21.2 26.5 30% Arc-Bis(29:1) 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 8.0 10.0 1.5M Tris-HCl, pH8.8 1.3 2.5 3.8 5.0 6.3 7.5 10.0 12.5...
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
通常在SDS-PAGE电泳实验中用到以下几种试剂: 1、主要试剂 30%凝胶贮备液:丙烯酰胺(Acr)29.2g,亚甲基双丙烯酰胺(Bis)0.8g,加双蒸水至100mL。外包锡纸,4℃冰箱保存,30天内使用。 分离胶缓冲液(1.5mol/L): Tris 18.17g,加双蒸水溶解,6mol/L HCl调pH8.8,定容100mL。4℃冰箱保存 ...
英文名称:SDS-PAGE 产品类别:科研试剂 产品编号:0012A1 CAS号 :0012A1 规格 价格库存 可制30-50块胶 ¥ 320200 立即订购 订购热线:021-34661276 收藏此商品 我要询价 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制PAGE胶(即聚丙烯酰胺凝胶)。
凝胶浓度选择参照 货号 试剂盒浓度 蛋白最佳分离范围 P0065 6% 50-150KD P0085 8% 30-130KD P0105 10% 20-100KD P0125 12% 10-70KD P0155 15% 10-55KD 操作流程: 以制备一块0.75/1.0/1.5 mm的PAGE胶为例。 下层胶配方 凝胶厚度 下层胶A液 ...
SDS-PAGE凝胶配方及制胶 12%分离胶 体积 试剂 5ml 8ml 10ml 15ml 25ml 30ml 60ml 90ml 120ml 30%Acr-Bis(ml) 2 3.2 4 6 10 12 24 36 48 1.5M Tris-HCl PH8.8(ml) 1.25 2 2.5 3.75 6.25 7.5 15 22.5 30 ddH2O(ml) 1.65 2.64 3.3 4.95 8.25 9.9 19.8 29.7 39.6 10%SDS(ul) 50 80 100 ...
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...