在准备SDS-PAGE凝胶时,凝胶的浓度是指丙烯酰胺的总浓度,它决定了凝胶孔隙的大小,从而影响蛋白质的分离效果。浓度越高,孔隙越小,适合分离小分子量蛋白质;浓度越低,孔隙越大,适合分离大分子量蛋白质。 一、计算凝胶浓度的公式为: 凝胶总浓度 (T)=丙烯酰胺浓度+交联剂浓度凝胶总浓度 ...
PAGE凝胶的孔隙大小可以调整,在SDS-PAGE中,蛋白质被丙烯酰胺基团偶联的十二烷基硫酸钠(SDS)包裹,使得蛋白质带有负电荷。 通过调整凝胶的孔隙大小和运行条件,可以实现不同大小的蛋白质的分离。较小的蛋白质能够快速通过凝胶的孔隙,而较大的蛋白质则迁移速度较慢。因此,通过PAGE凝胶电泳,可以实现对不同蛋白质大小的...
聚丙烯酰胺凝胶浓度与蛋白质分离范围的关系: 聚丙烯酰胺凝胶浓度/% 蛋白质分离范围/kd 5 36—200 7. 选择浓度多少的SDS-PAGE胶好 选择多少浓度的SDS-PAGE好取决于需要检测的蛋白质分子量 参考范围如下 Trincine小分子胶 1~10 乳化剂检测_3.8女神节_心仪好物低价疯抢 3.8女神节,上淘宝选女装/化妆品/饰品/鞋包/...
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一种常用的蛋白质电泳技术,用于分离和定量蛋白质。以下是制作SDS-PAGE凝胶的基本配方和制胶步骤: 配方: 1. 1%丙烯酰胺(Acrylamide)溶液:将3.7g丙烯酰胺和60μl N,N'-亚甲基双丙烯酰胺溶解在0.5ml双蒸水中,搅拌均匀。 2. 2.5%BT(Bis-Tris...
SDS-PAGE凝胶的制备过程：1、 按要求装配好垂直电泳板，两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边，防止封闭不严而使聚丙烯酰胺液漏出。2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45～60℃角。3、 按配制所需%浓度凝胶的毫升数。4、 加入TEMED后，立即混匀，缓缓倒入两玻璃板间的胶床中，直到液体接近溢出时为止。5、 立即...
北京博泰斯生物技术有限公司 010-63834601 13581671794 SDS-PAGE 凝胶线性分离范围 在 SDS-PAGE 凝胶电泳中,选择适合目的蛋白的下层胶浓度至关重要;使目的蛋白落 在线性分离范围内是其最佳选择. 为了方便选择合适浓度的下层胶,现将其线性分离范围即最佳分离范围列表如下: SDS-PAGE 下层胶浓度 6% 7.5% 10% 12.5% 15...
今天去听了导师给研究生带的高级生物化学实验课,学习了SDS-PAGE电泳的一整套操作,简单总结一下。 制板检漏 制胶(1) 制备10%的分离胶(梳子插进去 往下1cm,划线)...