根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度。 表一:不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围 SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围 6%50～150kD 8%30～90kD 10%20～80kD 12%12～60kD 15%10～40kD 10% APS的配制-5mL: 将0.5 gAPS干粉溶于5mL灭菌水中,彻底溶解后分装,1mL/支,-20℃备存,每次取一管使用。
用5～15%的丙烯酰胺所灌制凝胶的线性分离范围如下表：SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合的分离胶上直接灌注浓缩胶,立即在浓缩胶溶液中插入干净的梳子。系统中所有组分都含有0.实验原理 •最广泛使用的不连续缓冲系统最早是由Ornstein(1964)和Davis(1964)设计的,样品和浓缩胶中含Tris-HCl(pH6.8),上下槽缓冲液含...
SDS聚丙烯酰胺凝胶的分离范围: 试剂及主要器材 通常在SDS-PAGE电泳实验中用到以下几种试剂: 1、主要试剂 30%凝胶贮备液:丙烯酰胺(Acr)29.2g,亚甲基双丙烯酰胺(Bis)0.8g,加双蒸水至100mL。外包锡纸,4℃冰箱保存,30天内使用。 分离胶缓冲液(1.5mol/L): Tris 18.17g,加双蒸水溶解,6mol/L HCl调pH8.8,定容...
不同浓度的PAGE胶可分离的蛋白范围并不相同,该凝胶的浓度指的是分离胶中丙烯酰胺的总浓度,它决定了凝胶孔隙的大小,从而影响蛋白质的分离效果。一般来说,凝胶浓度越高,孔隙越小,适合分离小分子量蛋白质;浓度越低,孔隙越大,适合分离大分子量蛋白质。常见PAGE分离胶浓度和对应的最佳蛋白分离范围如下表所示: ...
1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶): 不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围 6%胶50-150kD 8%胶30-90kD 10%胶20-80kD 12%胶12-60kD 15%胶10-40kD ...
选择浓度多少的SDS-PAGE胶好 聚丙烯酰胺凝胶浓度与蛋白质分离范围的关系:聚丙烯酰胺凝胶浓度/% 蛋白质分离范围/kd5 36—2007.5 24—20010 14—20012.5 14—10015 14—60浓缩胶浓度低;分离胶浓度高于浓缩胶,一般不小于5%。8KD的蛋白质可能就要用Tricine–SDS-PAGE系统,因
PAGE 胶的聚合原理:甲叉双丙烯酰胺和丙烯酰胺在过硫酸胺的作用下聚合,形成胶,如下图: P1 注:催化剂:过硫酸铵(AP)在隔氧的状态下,最好现配现用,使用新鲜的。 加速催化剂:TEMED,四甲基乙二胺。催化剂的作用是使单体聚合成网状聚合物。 SDS 聚丙烯酰胺凝胶的分离范围: ...