抗菌肽scygonadin毕赤酵母分泌表达采用PCR方法克隆获得拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因成熟肽片段,将其连接到Pichia pastoris酵母表达载体pPIC9K中,构建了分泌表达载体pPIC9k-Scy.电击转化毕赤酵母GS115,经表型筛选和PCR鉴定证实了目的基因已稳定整合入酵母基因组中.以甲醇诱导表达阳性克隆,上清中表达产物经过Tricine-SDS-PA...
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Scygonadin抗菌肽是一类阴离子抗菌肽,从锯缘青蟹体内分离得到,对溶壁微球菌和嗜水气单胞菌具有较好的抑制作用.研究从锯缘青蟹c DNA文库中找出Scygonadin抗菌肽的成熟核苷酸序列和对应的氨基酸序列,并根据毕赤酵母的偏好密码子进行密码子优化,优化后的密码子经人工合成后连接到毕赤酵母表达载体p PCIZαA上,构建锯缘...
锯缘青蟹抗菌肽Scygonadin基因的转录表达特性研究
拟穴青蟹抗菌肽scygonadin在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性
产物制备Scygonadin的抗体,阐明了Scygonadin蛋白在雄性拟穴青蟹的组织表达定位,为Scygonadin目标性应用以及其功能的深入研究奠定基础.主要研究结果如下: 1.Scygonadin基因在大肠杆菌中的表达及其抗菌活性:构建了Scygonadin基因的两种融合表达载体pTrc-CKS/scygonadin和pET28-scygonadin,融合蛋白CKS-scygonadin主要以...
主要研究成果如下: 1.Scygonadin2基因在毕赤酵母中的表达及抗菌活性:构建了pPIC9K-Scygonadin2真核表达载体,转化入毕赤酵母GS115中进行真核表达,对表达获得的抗菌肽进行亲和层析纯化后,进行抗菌实验.抗菌实验结果表明,真核表达的抗菌肽Scygonadin2对革兰氏阳性菌具有较好的抑杀活性,对被测的革兰氏阴性菌无抑杀...
Scygonadin is a novel antimicrobial peptide, which was originally isolated from the seminal plasma of the mud crab, Scylla serrata. Based on the partial 20-residue NH2-terminal sequence of the peptide, H-Gly-Gln-Ala-Leu-Asn-Lys-Leu-Met-Pro-Lys-Ile-Val-Ser-Ala-Ile-Ile-Tyr-Met-Val-Gly...
Scygonadin基因克隆序列分析抗菌肽Scygonadin是一种存在于甲壳动物中与生殖免疫相关的抗菌肽.研究采用RT-PCR和RACE技术,克隆三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)Scygonadin基因并进行序列分析.结果表明,三疣梭子蟹Scygonadin c DNA序列全长为549 bp,含有一个372 bp的开放阅读框(ORF),编码123个氨基酸,其中含29个...