由于saCas9基因显著小于常用的spCas9(4kb),因此可以采用AAV病毒系统进行表达。英茂盛业的AAV saCas9表达体系整合了AAV病毒系统的高效和CRISPR Cas9的基因编辑能力,您只需简单地合成两条引物,插入pAAV saCas9载体中,包装为腺相关病毒,就能开始您的高效基因编辑实验了。 ●在细胞或者动物高效转入saCas9及其sgRNA ●构建基...
在此项研究中,研究团队使用体内EGFP荧光报告系统,首先在单核苷酸水平对野生型(WT)SaCas9 的脱靶效应进行描述——他们观察到某些不匹配的sgRNA也可以显著激活野生型 SaCas9 脱靶切割活性。 为了减少SaCas9的脱靶效应,研究人员使用了一种定向筛选系统,它可以高效地选择具有期望特性和性状的SaCas9突变体。该系统基于人类细...
2)线性化腺相关病毒载体aav-crispr/sacas9,将所述双链sgrna寡聚核苷酸连入线性化的aav-crispr/sacas9载体,转化感受态细胞,筛选获得阳性克隆,摇菌,抽提质粒; 3)将步骤2)提取的含有所述双链sgrna寡聚核苷酸的aav-crispr/sacas9载体包装成腺相关病毒; 4)用步骤3)包装的腺相关病毒感染目的细胞,培养,收集被感染的目...
AAV-SaCas9操作手册 汉恒生物〩BAAV゛Cas9㏑NA 汉恒生物—腺相关病毒pHBAAV-SaCas9-gRNA操作手册一、腺相关病毒（Adeno-Associated Viral Vector，AAV）简介 腺相关病毒属微小病毒科(parvovirus)，为无包膜的单链线状DNA病毒。AA V 的基因组约4700bp，包括上下游两个开放读码框架(ORF)，位于分别由145个核苷酸...
lentirv2-luc慢病毒载体的构建:荧光素酶基因与嘌呤霉素抗性基因以ef-1α为启动子,通过p2a相连。荧光素酶基因的cas9蛋白切割靶点sgrna共列举了3条。 45.图3:sacas9蛋白b细胞优势抗原表位的筛选验证图。 46.使用从中国人群队列中筛选得到的sacas9蛋白特异igg抗体水平阳性的血清作为检测抗体,通过elisa的方法分别定量...
本发明公开了一种用于特异性靶向人CXCR4基因的sgRNA,其靶序列如SEQ ID NO:1～4中任一条序列所示.本发明还公开了包含有上述sgRNA的金黄色葡萄球菌CRISPR/SaCas9系统,以及用该系统特异性敲除人CXCR4基因的方法.本发明通过将特异性靶向人CXCR4基因的sgRNA与AAVCRISPR/SaCas9质粒连接成载体,包装成AAV感染细胞,简便,...
Cas9 is an endonuclease enzyme that introduces a double stranded break into the DNA when recruited to a specific DNA sequence by the sgRNA (single guide RNA). This double stranded break is repaired in mammalian cells either through Non-Homologous End Joining or Homologous Recombination. Non-Homolog...
S1278-MG1.2 AAV2/MG1.2-CMV-FLEX-saCas9-pA-U6-sgRNA(NC) 价格: ￥750.00~6000.00 优惠: 200元优惠券,满1500可用 500元优惠券,满1500可用 评论:0条 收藏:0 腺相关病毒包装规格: 金标AAV 5ul ≥1E+13V.G./mL 金标AAV 20ul ≥1E+13V.G./mL 金标AAV 50ul ≥1E+13V.G./mL 金标A...
sgRNA 基因敲除 1 个回复 | 最后更新于 2024-12-03 减肥呀减肥呀 2024-12-03 # 1 Spcas9与Sacas9的主要区别在于它们的来源、基因序列长度、识别的PAM序列以及应用特性。 来源与大小:Spcas9来源于化脓性链球菌,基因序列长约4.1kb,分子量较大;而Sacas9来源于某种球菌,基因序列长约3.3kb,分子量较...
在一个优选的实施方案中,所述载体为质粒为px601-aav-cmv::nls-sacas9-nls-3xha-bghpa;u6::bsai-sgrna(plasmid#61591)。 第三,本发明提供了上述crispr-cas9系统在制备治疗乙肝药物中的应用。 在一个优选的实施方案中,所述crispr-sacas9系统被包装于重组腺相关病毒基因组中。