④ 加入SA-β-gal染色液:将SA-β-gal染色液(含有5-bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside)加入细胞,可以根据实验需要选择加入细胞培养基或染色液,并在37°C条件下孵育一定时间(通常为12-16小时)。⑤ 停止染色反应:将染色液去除,用PBS洗涤细胞1-2次,停止染色反应。⑥ 观察和记录:在显微镜下观察细胞...
sa b gal染色原理 sabgal染色原理是一种用于检测酵母菌活性的染色方法。该方法利用了酵母菌内的β-半乳糖苷酶(sabgal)活性。在该染色方法中,将酵母菌培养在含有X-半乳糖苷(X-gal)的培养基中。如果酵母菌内存在β-半乳糖苷酶活性,则该酶会将X-gal水解成蓝色产物。因此,在染色后,只有具有β-半乳糖苷酶活性...
SA-βgal有两种检测方法。第一种是化学染色,使用显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚基β- d -半乳糖苷(5-bromo-4-chloro-3-indoylβ-D-galactopyranoside,X-gal),这种底物在被β-半乳糖苷酶裂解时产生不溶性蓝色化合物。通过柠檬酸/磷酸盐缓冲液将pH控制在6.0,可以把SA-βgal和酸性β半乳糖苷酶活性区分开。另...
SA-β-gal染色法在细胞衰老检测中广泛使用。方法如下:首先,培养并调整细胞至生长期和典型形态。接着,使用4% paraformaldehyde或其他固定液固定细胞10-15分钟,然后用PBS洗涤细胞至少三次,每次约5分钟。随后,将5-bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside染色液加入细胞,根据实验需求选择在细...
不用无菌(都拿来染色了,前面固定,洗涤,都不是无菌的),是固定之后的细胞爬片或者冰冻切片的脑组织...
Q: 如果SA-β-gal染色实验结果出现假阳性信号,该如何减少? A: 减少假阳性信号的一个方法是使用更具特异性的SA-β-gal染料,并在反应过程中加入特定抑制剂以减少其他酶活性的干扰。 Q: 如果SA-β-gal染色实验中的荧光信号较弱,有什么办法可以提高信号强度?
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saβgal染色不需要蔗糖脱水。saβgal染色是一种常用的检测β-galactosidase活性的方法,该方法通常使用X-gal作为底物,在β-galactosidase的作用下形成蓝色产物。蔗糖脱水是一种处理组织或细胞样品的方法,可以去除样品中的水分,有助于保持组织或细胞形态,便于后续的处理和观察。所以saβgal染色不需要蔗糖...
染色步骤: (一) 冰冻切片 1、冰冻切片,滴加4%多聚甲醛(PFA),室温固定5分钟; 2、纯水洗涤3次,每次5分钟; 3、疏水笔画圈(稍大点); 4、纯水洗涤3次,每次1分种; 5、滴加SA-beta-Gal染色液(100ul/圈); 6、37℃染色过液2-24小时,镜下观察。
用平板分析法和细胞衰老检测试剂盒-SPiDER-βGal(货号:SG03)对不同传代水平的WI-38细胞进行荧光成像实验结果。结果证实了在2种试剂盒中,SA-β-gal染色在高传代的WI-38细胞中荧光强度有明显增强。注意:尽管初始细胞接种密度是相同的,但由于较高传代水平下衰老细胞的增殖率较低,因此平板分析时的细胞密度会有所...