SA-βgal在永生化细胞系中无法检测到,除非经过基因或化学操作,使它们经历衰老。 SA-βgal染色实验,典型的阳性对照是正常成人成纤维细胞,通过氧化应激、电离辐射、RAS癌基因或任何方便的方法诱导衰老。阴性对照是较早代数的人类成纤维细胞或癌细胞。 培养细胞样本要避免细胞完全融合,在近融合状态下染色分析。组织切片的...
染色步骤: (一) 冰冻切片 1、冰冻切片,滴加4%多聚甲醛(PFA),室温固定5分钟; 2、纯水洗涤3次,每次5分钟; 3、疏水笔画圈(稍大点); 4、纯水洗涤3次,每次1分种; 5、滴加SA-beta-Gal染色液(100ul/圈); 6、37℃染色过液2-24小时,镜下观察。
SA-βgal升高不是衰老必需的,现在常作为衰老细胞的生物学标志。 SA-βgal检测方法主要分为细胞化学染色法和荧光法。 一、细胞化学染色法 SA-βgal在pH6.0时,可将 5-溴-4-氯-3-吲哚基β-D-吡喃半乳糖苷(5-bromo-4-chloro-3-indoyl β-D-galactopyrano...
FDG对细胞中的β-gal反应性较低,最大的原因可能是它缺乏细胞通透性。为探索这种可能,研究Xite™β-D-galactopyranoside检测β-Gal酶的敏感性,并将结果与FDG比较。用不同浓度的β-gal酶检测,并用1 μM的Xite™β-D-galactopyranoside或FDG孵育,最后用荧光酶标仪...
观察SA-β-gal染色阳性的细胞数目及SA-β-gal表达与否对于衰老细胞在分泌细胞因子,生长阻滞等细胞生物学功能上的影响.结果:在阿霉素诱导细胞发生衰老的过程中,TGFβ抑制剂SB431542能够抑制衰老细胞表达SA-β-gal,而SA-β-gal表达的缺失并不影响细胞衰老的其他特征性改变.结论:低剂量的阿霉素作用肿瘤细胞后,细胞会...
SA-b-gal染色实验检测目的基因消减对细胞衰老的影响 技术原理 大多数正常细胞在经过有限次分裂后会进入衰老期,不能再在一些常规刺激的诱导下进行分裂。其细胞周期,基因和蛋白表达都发生了改变。衰老的细胞体积会变大,在pH6.0时会表达高酶活性的β-半乳糖苷酶。利用细胞衰老时产生的β-半乳糖苷酶催化底物后,在光学...
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(senescence-associatedbeta-galactosidase,SA-β-gal);通过免疫组化法观察PI3K与p-Akt表达.结果 与模型组比较,陈皮,半夏组动脉内膜呈轻度增生改变;SOD浓度与对照组比较上升,差异有统计学意义(P<0.01),MDA和SA-β-gal则显著降低(P<0.01);大剂量和中剂量治疗组中PI3K下降水平与模型组比较,差异有统计学意义(P<...
(senescence-associated beta-galactosidase,SA-β-gal);通过免疫组化法观察PI3K与p-Akt表达.结果 与模型组比较,陈皮、半夏组动脉内膜呈轻度增生改变;SOD浓度与对照组比较上升,差异有统计学意义(P<0.01),MDA和SA-β-gal则显著降低(P<0.01);大剂量和中剂量治疗组中PI3K下降水平与模型组比较,差异有统计...
X-GAL琼脂培养基X-GAL Agar 5642 300g Nissui(日水) Nissui(日水)5642 麦康凯山梨糖醇琼脂培养基(颗粒)MacConkey Sorbitol Agar 5643 300g Nissui(日水) Nissui(日水)5643 伊红美蓝琼脂(EMB琼脂)EMB Agar 5644 300g Nissui(日水) Nissui(日水)5644 XM-G琼脂培养基XM-G Agar 5647 300g Nissui(日水) Ni...