通过 实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测这些候选内参基因的表达量,并利用 geNorm,NormFider 和 BestKeeper 三个软件及 RefFinder 在线分析工具评价候选内参基因的稳定性.结果表明,8 个候选内参基因的表达量在所有样本间的变化幅度存在差异 ;geNorm, NormFinder 和 BestKeeper 3 个软件筛选出的最佳内
RT-PCR和qPCR实验内参基因选择 目录 ➢内参基因概念和作用➢内参基因的选择➢参考示例 ➢内参基因概念和作用 加内入参标即题为内部参照，内参基入因标则题是在检测目的基因从D加NA入到标题 mRNA表达过程中可用来当作参照的基因。内参基因通常是表达稳定的管家基因。➢内参基因概念和作用 为了避免检测样本在RNA...
根据文献和糙皮侧耳基因组数据,选择14个糙皮侧耳基因为候选内参基因,根据候选内参基因的编码序列,通过Primer premier 5软件进行RT-qPCR引物的设计,引物长为18～27 bp,产物长为80～150 bp(表1)。所需引物由浙江尚亚生物技术有限公司合成,并进行PCR试验测验其...
近日,福建农林大学菌物研究中心在丝状真菌RT-qPCR内参基因的稳定性研究取得新成果,于2022年9月10日在Journal of Fungi(IF=5.724)发表了题目为“Genome-Wide Screening and Stability Verification of the Robust Internal Control Genes for RT-qPCR in Filamentous Fungi”的研究论文,报道了利用RNA-Seq数据鉴定到适用...
丝状真菌RTqPCR内参基因稳定性方面的最新研究成果主要包括以下几点：新型稳定内参基因的挖掘：福建农林大学菌物研究中心的研究人员在《Journal of Fungi》期刊上发表了一篇重要论文，通过RNASeq技术，成功挖掘出适用于丝状真菌RTqPCR的新型稳定内参基因。传统内参基因稳定性不足：研究发现，传统常用的内参基因如...
RT-PCR和qPCR实验内参基因选择 内参基因概念和作用 内参基因的选择 参考示例 目录 加入标题入标题加入标题 内参即为内部参照,内参基因则是在检测目的基因从DNA到 mRNA表达过程中可用来当作参照的基因。内参基因通常是表 达稳定的管家基因。 内参基因概念和作用 ...
也更具有特异性。只是反转录的试剂消耗要加倍的，同一个样品你必须单独反转录内参基因和目的基因。如果你要检测其他目的基因，相应消耗。至于内参基因，一般动物细胞的那几个内参基因，Acin，Tubulin,RPL32之类的，最好你能预先检测一下，挑一个最稳定的出来。
枸杞实时荧光定量ＲＴ－ｑＰＣＲ内参基因筛选与验证 李浩霞１，黄稳娥２，柳西宁２，朱馨蕾２，任晓月２，安 巍２，周 军３，赵建华２ （１．宁夏农林科学院林业与草地生态研究所，宁夏银川７５０００２；２．宁夏农林科学院枸杞科学研究所／国家枸杞工程技术研究中心，宁夏银川７５０００２；３．北方民族大学生物...
| 众所周知,在研究基因表达水平时,往往使用逆转录-荧光定量PCR(即RT-qPCR)对目标基因进行相对定量。这就需要设定在不同条件下表达量都相对恒定的基因作为内参 (internal control gene或reference gene)。一般来说,大家习惯选择一些常见的管家基因(house-keeping gene),如β-Actin (ACTB)、Actin-2 (ACT2)、GADPH...
大豆抗SMV侵染过程中RT-qPCR内参基因的筛选及胼胝质代谢相关基因的表达分析 1引言 RT-qPCR凭借其定量准确、高重现性、高灵敏度和高通量等特点,已经成为分子 生物学研究领域基因表达分析中一种广泛应用的方法。另外,它在基因拷贝数鉴定、 疾病标志基因的检测、食品中病原微生物的检测等方面也具有广泛的应用【l】。在...