1.PCR,通常指的是普通PCR,以双链DNA为模板,以dNTP为底物,定性扩增双链DNA。 2.qPCR和Real-time PCR,指的是实时荧光定量PCR,以cDNA为模板,以dNTP 为底物,对扩增出的DNA进行定量分析。 3.RT-PCR,指的是逆转录PCR,以由mRNA逆转录成的cDNA为模板,以dNTP 为底物,进行DNA的扩增,属于PCR的变种,结果只能定性,不...
1)样品处理:将生物样品进行处理,以提取高质量的DNA或RNA。 2)引物和探针的设计:根据目标基因序列设计特异性引物和荧光探针。 3)逆转录:对于分析RNA,首先需要进行逆转录以获得cDNA。 4)实时荧光定量PCR:使用特异性引物、探针和模板进行PCR反应。在每个循环中,探测器监测荧光信号的变化。 5)结果分析:根据荧光信号的...
● RT-qPCR(Reverse Transcription Quantitative real-time PCR)：这是一种将RT-PCR与qPCR相结合的技术，用于反转录定量实时PCR。通过在qPCR反应中使用cDNA来测量RNA水平，从而快速检测基因表达的变化。RT-qPCR可用于研究用抑制剂、刺激剂、小干扰RNA(siRNA)或基因敲除模型等处理模型系统时基因表达的变化。这项技术还经...
PCR,qPCR,RT-PCR,RT-qPCR四种技术的主要区别 🔷PCR是基础技术,适用于DNA的定性扩增和检测;qPCR在PCR基础上实现了定量检测,可以定量检测DNA的含量,提高了检测的准确性和灵敏度;RT-PCR则解决了RNA扩增的问题,用于RNA的扩增和检测;RT-q...
实时荧光定量PCR(Real-time PCR,Quantitative Real-time PCR,qPCR),即第二代PCR技术,是指在整个扩增的过程中,引入了荧光染料或者荧光基团,随着DNA数量的成倍增加,反应体系中的荧光信号也会增强。 在整个PCR反应过程中,借助对荧光信号的强弱进行检测实时监测每一个循环中扩增产物量的变化,最后通过标准曲线和CT值对待...
1各类 PCR ，分不清？PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应，是指在 DNA 聚合酶催化下，以母链 DNA 为模板，以特定引物为延伸起点，反应体系中加入 dNTP、Mg2+ 等原料，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板 DNA 互补的子链 DNA 的过程，可快速特异性地在体外扩增目的 DNA[1][2]。...
PCR是聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction）的简称，是一种体外扩增特定DNA片段的分子生物学技术。PCR技术自问世以来，在生物科学领域、分子诊断领域、亲子鉴定、法医鉴定以及犯罪调查等方面发挥了巨大作用，是迄今为止最为重要的技术之一。经过演化和革新，PCR技术已经发展了三代：普通PCR技术、实时荧光定量PCR技术（...
实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)指的是在PCR进行的同时,对其过程进行监测的能力(即实时)。因此,数据可在PCR扩增过程中,而非PCR结束之后,进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR (qPCR)中,反应以循环中首次检测到目标扩增的时间点为特征,而非在一定循环数后...
在分子生物学研究中,聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)是一项基础且关键的技术,广泛应用于DNA克隆、基因表达分析、病原体检测等多个领域。引物作为PCR反应的核心组成部分,其设计质量直接影响到实验的成败。本文将详细介绍常规PCR、实时荧光定量PCR(qPCR)、实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)以及ChIP-qPCR和MeR...