(2) 两相分离:每1 ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2 ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15 s后,15到30℃孵育2到3 min。4℃下12000 rpm离心15 min。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。(3)...
一步染料法RT-qPCR试剂盒 250反应 XG-P3133 一步染料法RT-qPCR试剂盒 500反应 XG-P3133 PCR相关试剂的特点: 主要包括特异性强、灵敏度高、扩增性能强和纯度要求低。 特异性强:PCR反应的特异性取决于引物与模板DNA的正确结合、碱基配对原则、Taq聚合酶合成反应的忠实性,以及靶基因的特异性与保守性。这...
产品名称:通用型RT-qPCR试剂盒(适用于探针法荧光定量RT-PCR) 英文名称:One-Step Probe RT-qPCR Kit 产品货号:BTN190504 产品规格:100T 本试剂盒是基于荧光探针检测的即用型RT-PCR试剂盒,可以对靶RNA分子进行实时定量RT-PCR分析。试剂盒含有经过优化的缓冲液组分、逆转录酶、热启动Taq DNA聚合酶、Taq DNA稳定剂...
以反转录得到的cDNA为模板进行PCR扩增,步骤如下:(参考汉恒生物qPCR试剂盒:HBStart Green qPCR Premix,此试剂盒所使用的是SYBR Green I 荧光染料,采用嵌合荧光检测法。) (1)反应体系的配制(10/20 μL体系) 【注】: I、DNA模板的添加量通常在100 ng以下,不同类型的模板目的基因拷贝数有所差异,必要时可进行梯...
TaqMan试剂通过采用荧光探针在PCR循环过程中随着特定PCR产物的累计而对其进行检测。工作原理: 步骤、过程 构建一段寡核苷酸探针:5’端标记荧光染料报告基团,3’端标记淬灭染料基团。当探针保持完整时,淬灭基团的靠近会通过空间上的荧光共振能力转移(FRET)而显著降低由报告染料基团发射的荧光。
将Rt-qPCR所需要的试剂如:无酶水,SYBR,上下游引物等以及样品(cDNA)置于冰上备用。03混合无酶水、SYBR、上下游引物 根据以上点样规划,计算每种引物所在位置孔位数,如内参基因为A列及E列上样,需要加24个孔,一般配Mix时需要多配2个孔,我们按26个孔的量,除cDNA(1μL)后需配置余下体系。准备一个EP...
若不配制 Master Mix,向步骤 1 的反应液中添加试剂时,要先加入 RNase Free dH2O 和5×PrimeScript Buffer 2 (for Real Time)混合均匀,以使 gDNA Eraser 的活性充分受到抑制, 再添加 RT Primer Mix、PrimeScript RT Enzyme Mix I,轻轻混匀进行反转录反应。
从FFPE样本中提取和纯化RNA,然后使用MammaTyper试剂盒在CFX96 qPCR循环仪上评估ESR1、PGR、ERBB2和MKI67基因的mRNA表达。计算连续变量的中位数、最小值和最大值,并将分类变量表示为绝对和相对频率。使用正百分比一致性(PPA)、负百分比一致性(NPA)和总体百分比一致性(OPA)以及Cohen's kappa统计量来评估Mamma...
高乘数的试剂利于冻干 冻干原料体系中的保护剂含量需明确 冻干对酶有一定损伤,补酶量需调试 Hieff Unicon® V Lyo-nCoV Multiplex One Step RT-qPCR Kit (withMgCl2)(CAT#13775) 一种无甘油、即用型的分子诊断试剂,含有耐热逆转录酶、热启动Taq DNA聚合酶...