4.在一个实验中不论是绝对定量还是相对定量都需要做标准曲线,做标准曲线的方法,以反转录得到的cDNA为模板,用qPCR的引物做PCR得到的产物为模板,产物先稀释10000倍,以稀释后为基底,以10为倍数,稀释7~8个梯度(稀释点越多,稀释倍数越大,数据越精确),做qPCR,然后得到标准曲线。利用标准曲线可以验证下列因素: (1)扩...
SHENTEK® 逆转录酶活性检测试剂盒 (RT-PCR 荧光探针法) 说明书 货号:1505700 版本:A/5 仅供研究用 湖州申科生物技术股份有限公司 版本:A/5 SHENTEK® 试剂盒简介 逆转录酶活性检测试剂盒,符合《中国药典》2020 版逆转录酶活性检查法,利用 MS2 RNA 为模板,经反转录后再采用荧光探针 qPCR 技术检测特异...
以下的Protocol主要适用于(1)所使用的DNA1、反转录酶、RNA酶抑制剂以及dNTPs均是Fermentas公司的;而在qPCR中,所使用的Supermix是Bio-RAD公司的。2. RT-qPCR中的注意事项:( 1) MgCl2的浓度24mM;( 2) 模板的浓度50ng5pg之间;( 3) 引物的浓度,500nM比较合适,若反应效果不好可以在0.11uM之间选择;( 4) 退火...
RT-qPCR操作说明书.doc,注意事项 以下的Protocol主要适用于(1)所使用的DNA1、反转录酶、RNA 酶抑制剂以及dNTPs均是Fermentas公司的;而在qPCR中,所使用的Supermix是Bio-RAD公司的。 RT-qPCR中的注意事项: MgCl2的浓度2~4mM; 模板的浓度50ng~5pg之间; 引物的浓度,500n
以反转录得到的cDNA为模板进行PCR扩增，步骤如下：（参考汉恒生物qPCR试剂盒：HBStart Green qPCR Premix，此试剂盒所使用的是SYBR Green I 荧光染料，采用嵌合荧光检测法。）（1）反应体系的配制（10/20 μL体系）【注】：I、DNA模板的添加量通常在100 ng以下，不同类型的模板目的基因拷贝数有所差异，必要时可...
产品说明书: 本试剂盒基于BalbScript 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix和BalbStart SYBR qPCR UltraMix,具有高灵敏度,高效合成能力和扩增效率。该试剂盒能以动物、植物和微生物的总RNA或mRNA为模板,用BalbScript 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix进行反转录,用BalbStart SYBR qPCR UltraMix进行荧光定量。 保存温...
对于细胞基质和牛血清样品,参考病毒核酸提取试剂盒说明书里的细胞基质 方法 2 流程进行病毒核酸提取.(具体步骤请参考病毒核酸提取试剂盒说明 书). 阳性对照品(PCS) 使用 PI-3 阳性对照品作为阳性对照 PCS,在提取阶段和同批待测样品一起进 行相同的样品前处理,制备成 PCS 纯化液用于 RT-qPCR 检测. ...
产品说明书 FAQ COA 已发表文献 Hifair®V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。 本试剂盒利用耐热Hifair®V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并...
精品文档注意事项1,以下的Protocol主要适用于1所使用的DNA1反转录酶RNA酶抑制剂以及dNTPs是Fermentas公司的,而在qPCRt所使用的Supermi,是BioRAD公司的,2,RTqPC珅的注意事项,1
FastKing一步法反转录-荧光定量试剂盒 ( 探针法 ) 目录号:FP314 3.进行RealTimeOneStepRT-qPCR反应 PCR反应管请用离心机瞬时离心后放入荧光定量PCR仪中进行RealTimePCR反应。建 议采用下列图表显示的标准PCR反应程序,如果使用该程序得不到良好的实验结果时,再进 ...