RT-qPCR实验技术方案基本概念荧光定量逆转录PCR(quantitativereversetranscriptionPCR,RT-qPCR)是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实现了实时监测整个PCR进程,并对起始模板进行定量分析的方法。首先通过采集的样本来提取RNA,然后将提取的RNA通过逆转录酶合成互补DNA(cDNA)。随后,以cDNA为模板进行qPCR 反应,实时...
基因提取是RT-qPCR实验的第一步,它的目的是从样本中提取出纯净的DNA或RNA。这一过程对于后续实验的成功至关重要。目前,有多种基因提取技术可供选择,如柱层析、磁珠技术和酚氯仿提取等。每种技术都有其独特的优势,但也伴随着不同的挑战。优质的基因提取不仅能够提高实验的效率,还能够确保数据的准确性,从而为研究者...
科研干货 | 细胞培养必看1、严格的清洁与消毒:2、正确的操作习惯:3、保持实验区域的无菌环境: 7 -- 0:13 App 什么?RT-PCR实验还出错?可能是这几点你还没注意! 10 -- 0:13 App 如何确保FRET实验结果的准确性? 3.2万 1 0:17 App 弟弟练习了很久的动作终于有了成果 -- -- 0:07 App 做酵母杂交实验...
荧光定量PCR的技术要点及实验优化方案 荧光定量PCR的数据分析要点 RT-qPCR常见问题分析 主讲嘉宾: 范宇博士,TIANGEN高级产品经理,获得北大工学院生物医学工程博士学位,主要负责RT-qPCR和miRNA产品线,研究方向为miRNA和癌症发生之间的关系,以第一作者的身份发表SCI论文一篇(IF=5),在投一篇(IF>10)。 报名方式与场次安排...
RT-qPCR实验方案样本处理 样本采集 1.避免外源RNase影响 外源无处不在RNase是导致RNA降解的主要因素。采集和实验环境要尽可能整洁，使用的耗材需要用DEPC处理或购买无酶耗材；同时实验人员操作迅速熟练，缩短降解时间 2.避免内源RNase影响 某些富含RNA内源酶的部位 (如脾脏、胸腺) 本身就容易降解，建议在液氮条件下将...