荧光阈值(threshold):在扩增曲线的指数增长区域内的适当位置上设定的荧光检出界限,一般是基线标准差的10倍。 Ct值(cycle threshold):每个反应管里的荧光值达到阈值时的PCR循环次数。Ct值与起始拷贝数的对数存在线性关系,起始拷贝数越多,Ct值越小。 通过这些参数,RT-PCR能够精确地定量分析DNA或RNA的拷贝数,为分子生...
Ct值。C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含义是：每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数。每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值，因此只要获得...
实时荧光RT-PCR检测结果中Ct值表示()A.荧光信号阈值;B.待检样本荧光信号达到阈值的循环数;C.荧光信号的极限值;D.核酸拷贝数。
核酸检测CT值是指通过RT-PCR技术实时监测反应管中荧光经历多少循环数达到预定的阈值。通过加入荧光基团,使得核酸复制转录形成新的DNA链中含有荧光标记,就可以记录荧光数量判断病毒核酸浓度。病毒核酸浓度越高,荧光强度越高,循环阈值CT越小。PCR反应过程约70~80分钟。CT值越低,病毒载量越大,传染性越强。但是各国对该...
7、荧光定量PCR实验中无Ct值出现 (1)反应的循环数不够:一般要在35个循环以上,但是过多的循环次数可增加背景值。 (2)检测荧光信号的步骤有误:SYB-Rgreen法(SG法)采用的是72℃延伸时采集荧光信号,Taman法则是在退火结束或延伸结束时进行信号采集。
RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆 特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组 DNA的污染。使用天为时代公司的总RNA提取系统（如目录号 DP405和DP406），所获得...
本人在做荧光定量PCR,选取16srRNA作为内参,定量该株细菌某个次生代谢产物的基因表达量。 结果,内参的CT值很低,在5-15之间,大部分处理都是在10以下,而此生代谢产物那个基因的CT值在15-25之间。这种情况正常么? 请各位路过的大神指教啊~!不甚感激!!! 返回小木虫查看更多分享...
解决方法:以质粒为模板进行普通pcr扩增，得到的产物纯化后定量，计算拷贝数后稀释，作为标准曲线模板，要...
第一次做RT-PCR,过程中遇见一些问题希望各位大侠帮忙解决一下!我做相对定量RT-PCR,实验过程中发现,内参基因16sCT值为14,目标基因C值在25左右,我的内参基因CT值过小怎么办,这样的数据是不是不能用,我将模板进行了1:300稀释,CT值变化不是很大,如果进行1:1000稀释的话