实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针 和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发岀的淬灭基团,新链 延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发岀荧光。利用 RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( ) A. RT-PCR技术需要用...
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光,利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法正确的是( ) A. RNA不能作为PCR扩增的...
RT-PCR:逆转录PCR结合了RNA的逆转录与cDNA的聚合酶链式扩增,是PCR的一种变体,可对RNA进行分析。 首先以RNA为模板在逆转录酶的作用下合成对应cDNA,再以cDNA为模板通过PCR进行DNA扩增。归根结底,其就是在PCR过程前加了一个反转录过程,之后即可进行普通PCR。 图2. RT-PCR流程图 qPCR与RT-qPCR从DNA到RNA的定量跃...
实时定量RT-PCR作为分子生物学常用检测技术，在乙型肝炎病毒全长RNA检测方面具有显著优势。这项检测能准确反映患者体内病毒复制活跃程度，对应临床常用HBV-DNA检测形成有效补充。检测实施前需完成引物探针设计验证、标准物质制备、反应体系优化三项核心准备工作。引物探针设计要求覆盖HBV基因组两个不同区域，针对P基因设计的外...
流感病毒的基因组是负链RNA,在进行PCR扩增前必须合成与病毒RNA互补的DNA,即为cDNA。逆转录酶(RT)就是用于合成cDNA的多聚酶,因此,扩增流感病毒基因组的过程称为RT-PCR。 RT-PCR需要一对型别特异引物,四种脱氧核苷酸(dNTPs),RNA模板,逆转录酶及Taq DNA多聚酶;首先由逆转录酶将病毒的RNA逆转录合成cDNA,然后再进...
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如图所示。下列说法错误的是( ) A. 若检测结果有强烈荧光...
实时荧光RT-PCR可用于RNA病毒的核酸检测,其原理是:在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合,探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团,新链延伸过程中,DNA聚合酶会破坏探针,导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光。利用RT-PCR进行核酸检测的相关过程如下图所示。下列有关叙述错误的是( ) A. 该技术的原理...
乙型肝炎病毒前基因组RNA RT-PCR试剂盒 ELISA试剂盒技术流程 双抗体夹心法(检测未知抗原) 间接法(检测未知抗体) 1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。
本章将简介检测流感病毒聚合酶链式反映(PCR)。 流感病毒基因组是负链RNA,在进行PCR扩增前必要合成与病毒RNA互补DNA,即为cDNA。逆转录酶(RT)就是用于合成cDNA多聚酶,因而,扩增流感病毒基因组过程称为RT-PCR。 RT-PCR需要一对型别特异引物,四种脱氧核苷酸(dNTPs),RNA模板,逆转录酶及Taq DNA多聚酶;一方面由逆...
所有阳性标本除采用基于RNA的NGS(标准方法)检测外,还均采用两种不同的方法进行断裂-分离RET FISH检测,并采用RT-PCR检测。 最常见的RET伴侣是KIF5B(78.9%),其次是CCDC6(15.8%)。2例RET NGS阳性而FISH阴性的样本均存在KIF5B(15)-RET(12)融合。RT-PCR未检出的3种RET融合基因分别为AKAP13(35)-RET(12)、KIF5B...