RT-PCRProtocolRT-PCRProtocol 一、实验器具与材料: 1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸头:1ml、200μl、20μl 3、匀浆管:5ml 4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个 5、EP管:1.5ml、0.2ml 6、量筒:50ml、250ml、500ml...
(3) PCR 扩增:以合成的 cDNA 为模板进行 PCR 或 qPCR 实验。(RT-qPCR 分一步法 RT-qPCR 和两步法 RT-qPCR 两种)。 (4) 产物分析:通过琼脂糖凝胶电泳 (RT-PCR) 或荧光信号 (RT-qPCR) 分析扩增效果。 此外,一种将 RT-PCR 与 qPCR 相结合的技术,逆转录定量实时 PCR (Reverse transcription quantitative...
RT-PCR就是逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。 什么是qPCR、Real-time-PCR? 其实Realtime-PCR和qPCR(Quantitative Rea-lti me-PCR)...
RT-PCRprotocol RT-PCR 实验步骤 一、总RNA提取 1. 取200mg组织，放到1.5mlEP管中，加入1mlTrizol剪碎。 2. 震荡30s。 3. 加0.2ml氯仿，剧烈摇动30s，室温3min。 4. 12000×g，4℃离心，15min。 5. 吸上层无色水相，移入另一EP管中（约0.5ml）。 6. 加等体积异丙醇...
2.《实验protocol大全》 3.生物实验必看之《实验室保命指南》 往期高赞内容推荐: 我心目中检测技术史上的几次革命性发明分别是基于抗原抗体特异性结合原理的免疫标记技术,PCR技术和测序技术。今天我们来聊聊PCR技术。 按照PCR技术的演进,人们习惯性的将PCR技术划分为三代:普通PCR技术,实时荧光定量PCR技术和数字PCR技术...
2代CFbs(心肌成纤维细胞,40ml培养瓶内,瓶底面积约25mm)换无血清培养基一天, 镜下见细胞几乎呈融合状态。 实验准备: 实验前两天开始: 浸泡 1.DEPC用纯水按0.1%浓度配制,1.1升(1升浸泡,100ml配酒精) 2.Tip10卩L200卩L(多多益善,尤其是10卩L tip 3.EP Tube(1.5ml)(多多益善,尤其是需要分装试剂时) ...
(3) PCR 扩增:以合成的 cDNA 为模板进行 PCR 或 qPCR 实验。(RT-qPCR 分一步法 RT-qPCR 和两步法 RT-qPCR 两种)。 (4) 产物分析:通过琼脂糖凝胶电泳(RT-PCR)或荧光信号(RT-qPCR)分析扩增效果。 此外,一种将 RT-PCR 与 qPCR 相结合的技术,逆转录定量实时 PCR(Reverse transcription quantitative real-...
/ RNeasy kit (Qiagen)/ RNeasy Mini Kit (Qiagen) according to themanufacturer’s protocol /...
Oddly, the section referring to in situ localisation includes a protocol for the detection of Mycobacterium paratuberculosis DNA with never a mention of RNA, much less RT-PCR. The obvious appeal of this volume is to nervous neophytes attempting RT-PCR for the first time, or more practised ...
了解更多 👉反转录-聚合酶链反应 protocol 什么是 qPCR、Real-time-PCR? 其实Rea-ltime-PCR和 qPCR(Quantitative Rea-ltime-PCR )是一码事,都是实时定量 PCR,指的是 PCR 过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精...