我也做得RT-PCR,是提取某物种中未测序的一段基因.是用近缘物种基因进行比对,得到保守序列设计引物,再提取总RNA,RT-PCR得到目的基因的片段 分析总结。 是用近缘物种基因进行比对得到保守序列设计引物再提取总rnartpcr得到目的基因的片段结果一 题目 做RT-PCR设计引物时,找引物序列有哪些好方法? 答案 我也做得RT...
你可能会问,怎么能保证,正好是目标DNA在大量进行复制呢?这里面起主要功能的就是这个DNA引物了。 DNA引物是根据目标DNA进行设计的,也就是它的一段序列是正好可以和目标DNA进行结合。所以,引物设计前,是需要知道病毒反转录的DNA序列。病毒的序列还有其可用的引物序列其实在很多公开文献中也都有报道了。 那如何识别目标...
RT-PCR引物序列 基因来源 引物序列 产物大小(kb) β-actin 人 有意义链CCTCG CCTTT GCCGA TCC 反义链GGATC TTCAT GAGGT AGTCA GTC 0.62 kb β-actin* 大鼠 有意义链TACAA CCTCC TTGCA GCTCC 反义链GGATC TTCAT GAGGT AGTCA GTC 0.62kb β-actin 小鼠 有意义链GTCGT ACCAC AGGCA TTGTG ATGG反义...
新型冠状病毒是一种仅含有rna的病毒,病毒中特异性rna序列是区分该病毒与其他病原体的标志物. 检测原理: 核酸检测盒包括: 逆转录酶试剂, 病毒核酸标准试剂, 热稳定dna聚合酶, 引物序列, 特异性的荧光dna探针(带荧光的一段特异性的新冠病毒的核酸序列,这...
1.上下游引物要保守: 为了能够扩增出所需要的保守片段,必须对保守的100-200片段进行pcr扩增。所以引物的选取也要非常的保守,最好不要有不同的碱基,若不得不有时,也必须保证引物的3’端至少有4个碱基是完全保守才可。 在设计保守引物时,要在发表序列上分别找保守一致的区域,即在发表序列的5’端引物位置找的是...
1、.RT-PCR常用引物序列RT-PCR引物序列 基因来源 引物序列 产物大小(kb) -actin 人 有意义链CCTCG CCTTT GCCGA TCC 反义链GGATC TTCAT GAGGT AGTCA GTC 0.62 kb-actin* 大鼠 有意义链TACAA CCTCC TTGCA GCTCC 反义链GGATC TTCAT GAGGT AGTCA GTC 0.62kb -actin 小鼠 有意义链GTCGT ACCAC AGGCA...
。RT-PCR常用引物序列RT-PCR引物序列基因来源引物序列产物大小(kb)β-actin人有意义链CCTCGCCTTTGCCGATCC反义链GGATCTTCATGAGGTAGTCAGTC0.62kbβ-actin*大鼠有意义链TACAACCTCCTTGCAGCTCC反义链GGATCTTCATGAGGTAGTCAGTC0.62kbβ-actin小鼠有意义链GTCGTACCACAGGCATTGTGATGG反义链GCAATGCCTGGGTACATGGTGG0.49kbGAPDH...
采用1.5%琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物的量(取10μl扩增产物) 、引物扩增的特异性及长度 。并可根据标准DNA的量,粗略计算 PCR产物的总量。本次实验PCR产物长度: Os L29-m-PCR( A):340bp: 引物序列L29-m : up: 5’-TgCgTgTTCgCgCCCTACTT-3’;
RT-PCR是一种从细胞RNA (mRNA)中高效灵敏地扩增cDNA序列的方法,它由两大步骤组成:一步是反转录(RT),另一步是PCR。获得总RNA或mRNA后,即可进行RT-PCR。首先,在反转录酶作用下将RNA(mRNA)反转录成cDNA,以该cDNA第一链为模板进行PCR扩增,根据靶基因设计用于PCR扩增的基因特异的上下游引物,基因特异的上游引物与...
质上是在 DNA 聚合酶作用下, 一条引物在另一条引物序列上进行延伸所形成的与二条引物长度相近的双链 DNA 的片段, 是 PCR 常见的副产品, 有时甚至成为主要产物。 形成引物二聚体原因 1、最根本的原因是引物之间或者自身存在互补序列。 2、模板量过低; ...