设置对照 是为了质控，阳性对照是保证你的反应体系没问题，可以扩增 阴性对照也是保证你的反应体系没问题，没有非特异扩增，没有引物二聚体，没有实验室污染等
RT-PCR阴性对照有目标条带是什么情况 各位大神好,我最近在做RT-PCR,RNA提取和逆转录应该都没有问题,但是用逆转录得到的cDNA作模板跑出来的pcr电泳,阴性对照始终有条带; 如图,从左至右,第二个和第六个为阴性对照(用水替代模板,其它一样),但是阴性对照也有带,且位置和亮度与加模板p出来的产物基本一致,条带大小...
后来为了排除提RNA过程的操作问题我没提RNA直接在RT-PCR反应液里分别加无酶水、阴性和阳性对照，结果...
这个对照是自己定义的，要在method里面说明，一般是选择阴性对照。
我的情况跟你一样，找不到污染的原因，什么都换了新的，后来换了新的荧光定量试剂盒就好了 ...
我做miRNA RT-PCR总是条带在700bp，或者就是阴性对照里也有条带，各位有做过的吗？跪求解答 @gyes...
RT,最近老板让我查此方面的材料,想用western或RT-PCR筛查一些癌细胞中NF-kB是否组成型表达,要阴性/阳性对照细胞株,来说明结果如何才能判定为组成型激活。但我查了好多文献,都没有说阴性/阳性对照细胞株的,请问有研究此方面的同行吗,指点一下。谢谢! [ Last edited by youngsun50 on 2014-1-8 at 01:09 ] ...
低于100bp有可能是引物二聚体，可以提高退火温度或是降低引物的上样量，也有可能是DNA污染哦。每次跑...