钙调素mRNART-PCR钙拮抗剂白细胞心血管病应用RT-PCR方法,以β2微球蛋白(β2M)为内标,建立了人白细胞钙调素mRNA表达水平的半定量测定方法.初步了解了不同时期内服用钙拮抗剂(CaA)的心血管病患者细胞内CaMmRNA表达的变化规律,从而为临床疾病的防治提供了一定的依据王咏梅徐建平赵权李晓军武建国临床检验杂志...
荧光定量RT-PCR是一种高灵敏度、高特异性的检测基因表达水平的方法。通过荧光染料或探针标记的特异性引物，实现对目标基因的定量检测，具有较高的准确性和可重复性。荧光定量RT-PCR技术简介 荧光定量RT-PCR是一种高灵敏度、高特异性的检测基因表达水平的方法。通过荧光染料或探针标记的特异性引物，实现对目标基因的...
在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。可用于检测细胞/组织中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等。 PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①...
实时RT-PCR定量检测NGF mRNA表达水平方法的建立
摘要: 目的 检测胆囊结石患者﹑胆囊息肉患者及肝移植供体胆囊组织中血管活性肠肽受体1(VIPR-1)及血管活性肠肽受体2(VIPR-2)mRNA表达的改变,探讨其变化在胆囊疾病发病过程中可能发挥的作用。方法 采用RT-PCR技术检测25例胆囊结石患者﹑8例胆囊息肉患者及7例肝移植供体胆囊组织中血管活性肠肽受体1(VIPR-1)及血管活性...
荧光定量RT-PCR检测AFPmRNA基因表达李娜朱勋梅贾玮坤荧光定量RT-PCR原理•RT-PCR技术与荧光探针结合•RT-PCR是将RNA经反转录酶的作用反转录(RT)合成cDNA,再以反转录产物cDNA为模板的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。•荧光探针随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加荧光探针(TaqMan...
mRNA目的应用RT-PCR法检测肺癌患者外周血和手术切除区域淋巴结中的微转移情况.方法用逆转 录PCR(reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR)法检测78例肺癌患者和30例肺良性疾病患者外周血和手术切除淋巴结中CK19(cytokeratin 19) mRNA的表达,另抽取10例健康人外周血作为对照.对所有淋巴结进行常规病理...
方法采取72例乳腺癌和41例乳腺良性疾病患者的外周血,运用RT-PCR技术进行mRNA的检测.结果72例乳腺癌患者HMGA2 mRNA有27例表达,总阳性率为37.50%.41例乳腺良性疾病者HMGA2 mRNA无1例表达.两组有统计学意义(x2=7.35,P<0.001).结论HMGA2可以用于临床检测乳腺癌患者外周血中微转移,有可能成为判断预后和指导治疗的...
RT 检测 建立 实时RT 实时定量 PCR 表达水平 实时检测 建立实时 水平的 系统标签: pcr ngfmrna 实时 表达水平 定量检测 ngf [收稿日期] 20110407[基金项目] 安徽高等学校省级自然科学研究资助项目(KJ2009B214Z),蚌埠医学院科研资助项目(BY0820)[作者单位] 蚌埠医学院 药理学教研室,安徽省生化制药工程中心,安徽...
摘要: 目的建立实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测6个血液肿瘤细胞株中PAX5和CD19的mRNA相对表达量.方法一系列稀释的反转录自NAMALWA细胞株总RNA的cDNA被用于构建PAX5、CD19和GAPDH扩增的标准曲线.实验证实靶基因(PAX5和CD19)与管家基因(GAPDH)的扩增效率一致,因此可以用比较循环数(Ct)法对PAX5和CD19的表达...