primescript rt reagent kit with gDNA Eraser(perfect real time)说明
RT-qPCR的第一步是对靶基因设计特异性的引物，引物设计的好坏，关乎着扩增效率的高低、产物特异性的与否，所以引物设计是实验成功的第一步。引物设计有以下几个原则：(1) 引物最好跨内含子设计（此原则下设计的引物将不受反转录试剂盒中是否含有gDNA Remover的影响）；(2) 引物长度一般在18~30 nt之间，扩增产物...
以下是RT-qPCR的实验操作流程: 🔬 实验原理:Real-time PCR通过荧光信号实时监测PCR进程。在指数扩增阶段,模板的Ct值与起始拷贝数之间存在线性关系,这为定量分析提供了基础。#医学生 #PCR #QPCR #实验手册 #细胞实验 68 1 28 10 举报发布时间:2024-10-18 17:40 全部评论 大家都在搜: 高冷小狗(生日版) ....
7. SSLPTM 短光程静态荧光 CCD 成像技术:采用 SSLPTM 短光程静态荧光 CCD 成像技术,荧光信号稳定、灵敏。 六、荧光定量 PCR实验操作流程 1. 打开Q2000B荧光定量PCR 仪,确认仪器设置正确。 2. 在全真彩触控屏上编辑 RT-QPCR 实验程序,包括预变性、扩增循环、延伸等步骤。 3. 配置 PCR 反应体系,加入 cDNA 产...
【实验】激光扫描共聚焦显微镜的原理及操作方法、注意事项 13:46 【实验】流式细胞技术的原理及操作方法、注意事项 22:37 【实验】细胞破碎方法,超声破碎仪,高压均质机的原理,使用方法,注意事项,破碎率的测定 26:00 【实验】普通PCR、荧光定量RT-qPCR、数字PCR的基本原理和操作方法,注意事项 19:05 【实验...
RT-qPCR一步法荧光定量操作指南2024-08-20 10:04:56 博学远山 江苏 举报 0 分享至 0:00 / 0:00 速度 洗脑循环 Error: Hls is not supported. 视频加载失败 博学远山 0粉丝 博学远山 04:33 如何进行血浆游离DNA提取实验? 08:19 质粒提取实验指南 05:51 miRNA茎环法逆转录与荧光定量 06:28 ...
一、RT-PCR操作步骤 1. RNA抽提 方法:TRlzol法。 主要成分:苯酚(具有裂解细胞和变性蛋白的作用)。 RNA抽提前准备:试剂耗材准备(注意RNase free)、样品的准备。 步骤:样品+1ml TRlzol室温裂解10min+200μL氯仿振荡30s后室温静置2-3 min;4℃低温离心(12 000g×20min);400μL上层水相+600μL异丙醇室温沉淀10...
以下是一般的RT-qPCR操作流程: 1. RNA提取: 从细胞、组织或其他生物样本中提取总RNA。 使用适当的RNA提取试剂盒,并按照试剂盒的说明书进行操作。 确保提取的RNA质量良好,无DNA污染,并且RNA的完整性得到保证。 2. RNA逆转录: 将提取的RNA逆转录为cDNA(互补DNA)。 使用逆转录酶和随机引物或特定的引物进行逆转录...
将cDNA进行适当稀释,避免高表达基因的CT值超出qPCR线性范围。通常将1ug RNA反转录的cDNA原液稀释10倍。📦操作条件: ✅ 佩戴干净手套和口罩,保持桌面整洁; ✅ 全程在低温环境下操作,如将引物、96孔板等放置于低温冷冻盒或冰上。💉枪头与移液枪选择: ...
在进行RT-qPCR之前,首先要明确你的干预时间和收样时间。例如,如果你正在研究炎症指标,那么6小时、12小时和24小时的样本可能会有明显的变化。🧪 **操作步骤**: 1️⃣ 配置你的PCR体系,以20μL的SYBR Green体系为例。 2️⃣ 混匀并离心后,将体系置于冰上预冷。