因此,本研究的结果表明,HMBS是HCC相关研究中相对定量RT-qPCR技术标准化的一个有前途的参考基因。 Ahn HR, Baek GO, Yoon MG, et al. HMBS is the most suitable reference gene for RT-qPCR in human HCC tissues and blood samples. Oncol Lett. 2021;22(5):...
(最好是500,要是没有刚好覆盖就可以,200μL也勉强可以,也不需要太多,直接在细胞上加入trizol是我比较喜欢的方式。) 每10cm2(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。trizol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。trizol加量不足可导致提取的RNA有DNA污染。 组织:每50-100mg组织加入1ml trizol...
单层培养细胞:单层贴壁细胞的收集 (收集细胞数量请不要超过 1×10⁷ ) :可直接在培养容器中裂解 (容器体积不超过 10 cm³) , 或者使用胰蛋白酶处理后离心收集细胞沉淀。(在摇瓶中培养的单层贴壁细胞通常采用胰蛋白酶处理的方法) 。 细胞和细菌悬液:离心取细胞。每 5×10⁶ - 1 × 10⁷ 细胞加入1...
答:如果不能将细胞分散成单个细胞悬液的话是无法用流式细胞法分析的;检测时最少要有 2000 个细胞,但最初准备样品时,如果只做外标,样品比最少细胞数大一个数量级即可;但要是需要作内标的话,固定液和穿膜液粘度大,细胞损失也多,而且,穿膜液一般对细...
在实时荧光定量PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行,PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线。 RT-qPCR是由三个步骤组成:...
可以用 10μL 阳性对照的 10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为 NC。8. 用自选方法纯化样品的 RNA,本试剂盒跟市场上大多数 RNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒RNAout。 三、Probe qPCR-PCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行): 9. 如果...
primescript rt reagent kit with gDNA Eraser(perfect real time)说明
实时荧光定量 PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 是 DNA 的实时 PCR 扩增,通过荧光探针测量,最常见的是插入染料或基于水解的探针,从而实现 PCR 产物的定量 (见图 2)。该技术常用于检测病原体的存在和确定感兴趣的 DNA 序列的拷贝数。 qPCR 流程图[11]。
n核酸的分类及分布核酸的分类及分布存在存在于细胞核和于细胞核和线粒体线粒体 分布于细胞核、细胞质、分布于细胞核、细胞质、线粒体线粒体(deoxyribonucleic acid, DNA)(ribonucleic acid, RNA)脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸 核糖核酸核糖核酸携带遗传信息,并通过复制传递携带遗传信息,并通过复制传递给下一代。给下一...
简单、有效的Cell Direct RT技术,只需7min即可得到RNA样本。 样品需求量小,最少10个培养细胞即可进行实验。 高通量,可以快速对384、96、24、12、6 孔板等培养细胞进行RNA检测。 DNA Eraser能够快速去除释放的基因组,大大降低对后续实验结果的影响。 优化的RT及qPCR体系,使两步法RT-PCR具有更高效的逆转录和PCR特...