有谁知道做RT-PCR需要哪些试剂?不买试剂盒的话, 相关知识点: 试题来源: 解析 做反转录需要用到的试剂: 反转录酶 反转录酶buffer RNA酶抑制剂 dNTP 反转录引物(oligo(DT)) PCR用到的试剂 dNTP Taq酶 Taq酶buffer 上下游引物 反转录cDNA模板反馈 收藏 ...
RT-PCR提取的RNA主要是rRNA,即核糖体RNA,但很少有人用它做些什么,倒是含量较少的mRNA,即信使RNA是中心法则所述的遗传信息表现的中转站,所以我们要把微量的信使RNA弄出来,更重要的是,RNA太容易分解了,环境中无处不在的RNA酶,以及其容易被水解的特点啊,我们不得不尽快把珍贵的信使RNA转化成稳定的形式,于是就有...
相关试剂 oligo：多聚体，相当于mRNA引物 AMV RT：禽类成髓细胞瘤病毒逆转录酶 MMLV RT：莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶 dNTPs：脱氧核苷酸 RNase抑制剂：防止RNase污染 PCR Buffer：RT-PCR缓冲液 MgCl2：2价镁离子 各步骤的目的 预变性 破坏DNA中可能存在的较难破坏的二级结构。使DNA充分变性，减少DNA复杂结构对扩增...
二、RT-PCR实验试剂和材料 大肠杆菌DH5a、Trizol试剂、逆转录试剂、PCR相关试剂、PCR产物克隆试剂、氯仿、异丙醇、DEPC水等。 三、实验器材 PCR仪、移液枪、台式低温离心机、恒温水浴锅、恒温培养箱、电泳仪、研钵、紫外分光光度计、移液器和吸头、硅烷化的PCR小管、DNA扩增仪、琼脂糖凝胶电泳所需设备(例如:电泳槽...
用于RNA定量的一步法RT-PCR 用于RNA定量的两步法RT-PCR DNA/cDNA定量 等位基因检测 通过IPC进行的正负检测 SYBR Green I染料试剂 SYBR Green I染料法采用了Applied Biosystems SYBR Green I染料,一种可以在PCR循环过程中随着PCR产物的累计而对其进行检测的高度特异性双链DNA结合染料。TaqMan和SYBR Green...
3．PCR：（1）取0.5ml PCR管，依次加入下列试剂：第一链cDNA 2μl 上游引物（10pM） 2μl 下游引物（10pM） 2μl dNTP(2mM) 4μl 10×PCR buffer 5μl Taq 酶（2u/μl） 1μl （2） 加入适量的ddH2O，使总体积达50μl。轻轻混匀，离心。（3） 设定PCR程序。在适当的温度参数下扩增28-32个...
聚合酶链式反应(PCR)一,准备工作 1,实验器具与材料: (1)移液枪:200ul、10ul (2)吸头:200ul、20ul (3)吸头台:放置 200ul和 20ul 的吸头一个 (4)EP管 1.5ml、100ul 2,实验器具的处理与准备 (1) 塑料制品:(包括吸头、EP管等) 送至高压 3次,试验前将枪头放入吸头台。 3, 试剂配制和准备: ...