RT-PCR,就是先把RNA反转录为cDNA,再PCR扩增.如果只想检测某个基因mRNA的量,可以做northern blot,或者定量RT-PCR(荧光实时PCR)结果一 题目 RTPCR的目的是什么?如果只想检测目的mRNA的量,还需做RTPCR吗? 答案 RT-PCR,就是先把RNA反转录为cDNA,再PCR扩增.如果只想检测某个基因mRNA的量,可以做northern blot,或...
RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。合成选择 合成cDNA引物的选择 1. 随机六聚体引物:当特定mRNA由于含有使反转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时,可采用随机六聚体引物这一...
RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术。首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段。RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平,细胞中 RNA 病毒的含量和直接克隆 特定基因的 cDNA 序列。 作为模板的 RNA 可以是总...
RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种RNA的含量。检测基因表达的方法,参见Northern Blot法。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录,要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种,即鸟类成髓细胞性白细胞病毒...
RT- PCR, ReverseTranscription-Polymerase Chain Reaction, 即逆转录PCR,是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。 RT-PCR原理 RT-PCR提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物, 利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板, 进行PCR扩增,从而获得目的基因或...
RTPCR的目的是DNA扩增。 只想检测目的mRNA的量,做QRTPCR。
(PCR是‘链式扩增反应’polymerase chain reaction 的缩写)故称为RT-PCR.\x0d再说其用途:\x0d我们提取的RNA主要是rRNA,即核糖体RNA,但很少有人用它做些什么,倒是含量较少的mRNA,即信使RNA是中心法则所述的遗传信息表现的中转站,所以我们要把微量的信使RNA搞出来,更重要的是,RNA太容易分解了,环境中无处不在...
PCR有很多种,其中RT-PCR,全称反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT...