(2) 引物长度一般在18~30 nt之间,扩增产物长度尽量控制在 80-150bp之间;(3) GC含量和Tm值,引物GC含量控制在40%~60%之间,Tm值应尽量在55~65℃之间,一般为60℃左右;(4) 引物3′端末端避免选择A;(5) 碱基分布:引物中四种碱基的分布是随机的,3′端避免超过3个连续的G或C;(6) 引物设计区域应避...
结果一 题目 半定量RT-PCR设计引物时产物长度为多少合适我说的是产物长度的限制哦 答案 18-25bp 产物啊,半定量无所谓吧.这年头为什么还做半定量呢,直接做q-pcr也不贵啊,产物80到500bp,偶喜欢100-300bp的样子.相关推荐 1半定量RT-PCR设计引物时产物长度为多少合适我说的是产物长度的限制哦 ...
可以的,50bp到150bp都可以,只要你设计的引物探针特异性好,是可以做出来的;不过一般都是100bp-150bp左右比较好,我研究过中山达安公司09年的H1N1检测试剂盒,通过TA克隆得知,他们的检测H1N1病毒的H1跟N1两管混合液中扩增目的片段的长度都是70bp左右。如果你的引物探针以及合成好的了话,就做实验吧...
荧光定量一般限定在100-250bp间,半定量似乎没有太严格的限制,可以放宽到500-600bp吧,再长些应该也问题不大,可能对逆转录要求更高些
此窗口可以链接到“引物搜索”、“引物编辑”以及“搜索结果”选项,点击Search按钮,进入引物搜索框,选择“PCR primers”,“Pairs”,设定搜索区域和引物长度和产物长度。在Search Parameters里面,可以设定相应参数。一般若无特殊需要,参数选择默认即可,但产物长度可以适当变化,因...
逆转录反应换用了9mers随机引物),用我的引进物进行一般PCR,终于得到我的产物,测序结果完全正确。尽...
引物长度 18-27bp 一般了解即可,主要还是靠软件/网页设计 GC% 40%-60% PCR产物长度存疑,莫非这是在说普通PCR? 如何知道自己设计或得到的引物是否跨外显子?Blast可以看图得知(需要同时输入引物对序列和参考模板序列,即对应RNA的accession号) PCR产物长度究竟多少合适?有说200-800的,有说80-200的(Primerbank的也...
所以我20ul体系各加1ul似乎不是很高啊,而且内参也是这个加的这个量,内参跑出来了2.退火温度问题,退火温度我做过梯度,一样,都没有条带,只有二聚体3.模板浓度问题,我的模板浓度是100ng,不知道是不是合适4.Mg2+浓度问题,有不少文章提到Mg2+浓度对实验影响很大,但是我不知道如何调整,Mg2+应该是在我买的pcr ...
这种创新技术提高了cMaster RTplusPCR的灵敏度和特异性。使cMaster RTplusPCR试剂盒既能进行一步法,又能进行两步法RT-PCR,而且具有很大的动力学检测范围,能扩增得到的PCR产物长度范围也很大(一步法反应最长可扩增5.3 kb片段;两步法方案最长能扩增12.3 kb 片段)。
如题,半定量RT-PCR扩增产物的长度在多少bp内是合适的。500bp-600bp之间可以吗