3 实时荧光定量 PCR (qPCR)实时荧光定量 PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 是 DNA 的实时 PCR 扩增,通过荧光探针测量,最常见的是插入染料或基于水解的探针,从而实现 PCR 产物的定量 (见图 2)。该技术常用于检测病原体的存在和确定感兴趣的 DNA 序列的拷贝数。图 2. qPCR 流程图[11]。同样要经过...
总的来说,PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR这四种技术的主要区别在于它们的应用领域和检测目标不同。PCR主要用于DNA序列的扩增和检测;qPCR可以实时定量检测DNA或cDNA的含量;RT-PCR主要用于RNA分子的扩增和检测;而RT-qPCR则结合了RT-PCR和qPCR的技术,可以对RNA分子进行定量分析。 本文信息搜集整理自互联网。
PCR,qPCR,RT-PCR,RT-qPCR四种技术的主要区别 🔷PCR是基础技术,适用于DNA的定性扩增和检测;qPCR在PCR基础上实现了定量检测,可以定量检测DNA的含量,提高了检测的准确性和灵敏度;RT-PCR则解决了RNA扩增的问题,用于RNA的扩增和检测;RT-q...
Real-time RT-PCR是qPCR和RT-PCR的组合,其中的“RT”是Reverse transcription(逆转录)的意思,所以RT-qPCR就是结合了荧光定量技术的逆转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析。因为RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析。与RT-PCR一样,RT-qPCR...
RT-PCR就是逆转录 PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行 DNA扩增。那什么是 qPCR、Real-time-PCR?其实Rea-ltime-PCR和 qPCR(Quantitative Rea-l...
3. dPCR,数字PCR,Digital PCR,或Dig-PCR 数字PCR是对PCR的改进,也称为第三代PCR。它是一种精准的核酸定量检测技术,利用泊松分布原理,将核酸样品分配到许多独立且平行的微反应单元(以纳升为单位)。每个反应室平均只有一个或没有目标DNA分子,然后加入荧光信号进行扩增。通过这种方式,可以精确计数靶标核酸分子,从而...
● PCR:包含DNA模板、DNA聚合酶、引物和dNTPs的反应混合物的重复加热和冷却循环。[1]每个循环都会使DNA的数量增加一倍左右,因为在下一个循环中,一条新的DNA链会成为复制的模板。这导致DNA数量呈指数增长。图1 PCR的第一个循环[1]● RT-PCR(Reverse transcription PCR):反转录PCR可以使用RNA作为模板,生成互补...
real time RT-PCR 指的是 qPCR+RT-PCR 的组合,是说将 mRNA 逆转录为 cDNA 后再作为模板进行实时荧光 PCR 分析,因为 RT-PCR 是可以定性的,但不能进行定量检测的。 所以不难理解 real-time RT-PCR(RT-qPCR) 就是结合了荧光定量...