RT-PCR 逆转录-聚合酶链反应大概是我们接触到的第二个PCR技术。 原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。
qRT-PCR和RT-PCR当然不是一种,一般qRT-PCR就是你后边提到的那一串英文,中文叫做实时定量PCR,这个不是半定量,southern杂交和Northern杂交才属于半定量。而RT-PCR通常指的是反转录PCR,英文是reverse transcription PCR,就是先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模板,用PCR方法加以扩增。半定量:半定...
RT-PCR技术在此基础上增加了逆转录步骤,先将RNA反转录为cDNA,再进行PCR扩增。这显著提高了RNA检测的灵敏度,常用于基因转录产物分析和目的基因获取。在实验中,需注意保护RNA完整性、设置阴性对照、内参选择以及防止平台效应等问题。更高级的qRT-PCR,即实时荧光定量PCR,用于精确测定基因表达和基因检测等。
简而言之,这三种技术虽然都是基于PCR原理,但在应用上有所区别。RT-PCR主要用于RNA的扩增检测,而qRT-PCR和Real-Time PCR则侧重于PCR反应的实时监测和定量分析。三者都在分子生物学研究中发挥着重要作用。
PCR、qPCR、RT-PCR和qRT-PCR四种技术都是基于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的技术,主要区别在于它们的应用领域和检测目标不同。PCR作为第一代技术主要用于体外靶基因(DNA序列)扩增和检测;qPCR可以实时定量检测DNA或cDNA的含量;RT-PCR基于mRNA合成的cDNA,实时监测并扩增获得靶基因(DNA序列)用于后续实验...
real-time PCR:实时PCR(real-time PCR)属于定量PCR(Q-PCR)的一种,以一定时间内DNA的增幅量为基础进行DNA的定量分析。Real-timePCR与reverse transcription PCR相结合,能用微量的RNA来找出特定时间细胞组织内的特别表达的遗传基因。这两种RT PCR的组合又被称之为定量RT-PCR(QRT-PCR)。
实时荧光定量反转录PCR(Real-time RT-PCR,RT-qPCR)是qPCR和RT-PCR的组合,所以RT-qPCR(也有人写成qRT-PCR)是结合了荧光定量技术的反转录PCR,即以mRNA或总RNA为模板,先反转录得到cDNA,再以cDNA为模板,通过荧光定量PCR进行定量检测分析(RT-PCR只可以定性,但不能进行定量分析)。
提问:RT-PCR,QRT-PCR,real-timePCR之间什么区别 - 回答:根据简写的命名原则,RT PCR指反转录PCR,qRT PCR指实时荧光定量PCR,real time PCR指定量PCR,不是反转录PCR
QRT-PCR在RT-PCR体系中同时加入内参标基因的引物,使目的基因和内参基因在同一条件下同时扩增。在扩增...