RT-LAMP具有高灵敏度,更便宜,更用户友好,并与各种样品类型兼容。这些特点使RT-LAMP成为HIV-1分子诊断和病毒载量监测定量分析的有前途的工具,特别是在资源有限的情况下。然而,RT-LAMP方法也存在一些局限性:首先,LAMP的复杂性提高了,特别是在引物设计中...
近日,杂志Communications medicine上发表了一篇题为“Specific quantification of inducible HIV-1 reservoir by RT-LAMP”的文章。作者提出了一种基于RT-LAMP的SQuHIVLa检测方法,用于检测表达tat/rev msRNA的细胞。作者设计了LAMP引物/探针组,专门用于高灵敏度和高特异性检测HIV-1亚型B和C的tat/rev msRNA,同时确保前...
目前最常见、应用最广的当属日本学者Notomi等在2000年开发的环介导核酸等温扩增技术LAMP,其技术特征是针对靶基因上的6个区域设计4~6条引物,利用链置换型的Bst DNA聚合酶在60℃~65℃恒温条件下进行扩增反应,在15-60 min内实现目标序列109-1010倍的扩增。 针对LAMP/RT-LAMP技术,翌圣生物可提供高品质等温扩增核心酶...
作者首先设计LAMP引物/探针组用于特异性LAMP检测HIV-1 tat/rev msRNA。以HIV-1 B亚型为例,创建tat/rev HIV-1 DNA一致性序列。使用PrimerExplorer V5软件生成初步的LAMP引物集。选择具有外显子跨越结合区域的引物,以避免包含内含子的基因组DNA扩增。生成环引物,并选择适合转化为自猝灭探针的引物。所选的引物必要时...
环介导等温扩增技术(LAMP)凭借其检测快速、价格低廉等优势,在POCT市场中脱颖而出。 环介导等温扩增技术,英文名称为Loop-mediated Isothermal Amplification(LAMP),特征是针对靶基因上的六个区域设计四条引物,利用链置换型DNA聚合酶(Bst酶)在恒温条件下(60-65℃)进行扩增反...
阈值的设定:LAMP的阈值跟LAMP引物的专一性密切相关,因此新设计的引物需要先在不加模板的情况下进行LAMP扩增,测定其Ct。Ct最好没有,如果有也最好不要低于60(每分钟采集一次荧光信号的话)。如果低于60,则最好重新设计引物。 实验有效性的判断:如果阈值设定为60,则样品制备阳性对照和扩增阳性对照的Ct应该在60以内,样...
侧流免疫层析试纸检测快速且成本低廉,但是灵敏度和特异性有待提高。聚合酶链式反应(pcr)通常是病毒诊断的金标准,但是这种方法的准确性依赖于大型的分析设备和专业的技术人员。作为替代方案,环介导等温扩增(lamp)由于使用了6个引物,具有较高的特异性,对杂质的耐受性较强,不需要昂贵的检测设备并且检测时间较短。
lamp在恒温下进行特定核酸序列的指数扩增,无需复杂的仪器设备,特别适合资源有限的实验室和现场快速检测。rt-lamp(逆转录环介导等温扩增)结合了逆转录步骤,适用于rna病毒的检测,包括sars-cov、流感病毒和其他呼吸道病毒。 4、然而,rt-lamp也存在一些挑战,如假阳性率较高和引物设计复杂。此外,lamp通常通过浊度法获得...
3、环介导等温扩增(lamp)检测技术的特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在dna聚合酶(bstdnapolymerase)的作用下,恒温条件下进行核酸扩增,具有操作简单、特异性强的特点。lamp检测技术的优势在于不需要变温、扩增速度快、仪器要求低、简便易操作,不具备专业技能的一般人员就能进行快速诊断。然而,目前lamp检测技术...
本发明提供了一种检测新冠病毒的RT‑LAMP引物和探针组合,属于病毒检测技术领域,该引物和探针组合检测新冠病毒时具有特异性强、准确性高的特点。本发明的基于RT‑LAMP技术检测新冠病毒的试剂盒,所用试剂廉价、易得,成本低。与行业检测金标准RT‑qPCR检测方法相比,能够达到相似的检测灵敏度,实现快速、灵敏、准确、简...