一、RPMI 1640培养基配制的准备工作: 首先我们要准备RPMI 1640培养基配制时所需要的玻璃瓶、天平、CO2、碳酸氢钠缓冲液、三蒸水(最好是现用现配)、玻璃棒或搅拌容器、过滤器、RPMI 1640培养基干粉、超净工作台以及称量工具等,其次,这些器具我们还要根据实验的无菌性进行无菌处理。如果准备工作没做好,就会影响到培...
RPMI 1640培养基的配制方法如下: 1)三蒸水的配制:去离子水用蒸馏器进行蒸馏(去除无机和有机杂质),重复三次,三蒸水就制备完成,制成的三蒸水应及时使用; 2)准备实验用具与材料:提前准备好500mL或1000mL玻璃瓶、天平、CO2、碳酸氢钠缓冲液、三蒸水、玻璃棒或搅拌容器、过滤器、RPMI 1640培养基干粉以及超净工作...
1、平衡盐液 2、天然培养基(小牛血清、胚胎液) 3、合成培养基(化学成分清楚) 三、RPMI1640培养基的配制 1、RPMI1640 10g 2、丙酮酸钠 0.11g 3、Hepes(羟乙基哌碃乙硫磺酸)5.925g 4、NaHCO3 2g 5、三蒸水 1000ml 电磁搅拌,过滤出菌,并进行无菌实验 四、过滤出菌 仪器:不锈钢正压滤器 材料:纤维素微孔虑...
1、因RPMI1640中含有的谷氨酰胺半衰期短,只有1~3周,故新配制的培养基使用2周后,再使用时,应临时补加谷氨酰胺。补加办法: 1)100倍浓缩的谷氨酰胺液使用时加入培养液总体积的1/100。 2)100倍浓缩谷氨酰胺溶液(200mmol/L)的配制:2.9222g谷氨酰胺,加双馏水至100ml,充分搅拌溶解后,过滤除菌。分装小青瓶(每...
配制方法分为六个步骤：1. 溶解干粉：按照比例将RPMI 1640培养基干粉添加到三蒸水中，使用玻璃棒或搅拌器搅拌至溶解。2. 添加补充物：根据细胞类型，添加氨基酸、无机盐、维生素、生长因子等营养成分。3. 添加添加剂：按照细胞特性与实验设计，添加双抗、胎牛血清等添加剂，促进细胞生长。4. 调节pH值...
培养基90%RPMI-1640+10%FBS 传代方法①准备:将移液枪、50mL离心管、100mL血清瓶、超净工作台紫外线照射20min;37℃恒温水浴预热基础培养基; ②配制:火焰灭菌基础培养基瓶口和血清瓶口,将50mL血清悬空倒入450mL基础培养基中; ③封口:用封口膜密封培养液瓶口,贴上对应的产品标签,培养液放回4℃冰箱中。酒精擦拭超...
实验中使用的RPMI-1640培养基通常都需要自己配制。而配制过程中需要注意到很多细节,否则就会影响到RPMI-1640培养基的效果。总结一下关于RPMI1640培养基的需知,可分为以下几点: 1.配制培养基新制备的三蒸水(即经过三次蒸馏收集的水,一般多用于,生物和医疗上的检验)是*选择。一般在试验前当天制备,前一天也可。注:...
培养基90%RPMI-1640+10%FBS 存储条件2-8℃避光保存,有效期一个月 形态澄清透明,淡黄色 操作步骤①准备:将移液枪、50mL离心管、100mL血清瓶、超净工作台紫外线照射20min;37℃恒温水浴预热基础培养基; ②配制:火焰灭菌基础培养基瓶口和血清瓶口,将10mL血清悬空倒入90mL基础培养基中; ③封口:用封口膜密封培养液...