1)三蒸水的配制:去离子水用蒸馏器进行蒸馏(去除无机和有机杂质),重复三次,三蒸水就制备完成,制成的三蒸水应及时使用; 2)准备实验用具与材料:提前准备好500mL或1000mL玻璃瓶、天平、CO2、碳酸氢钠缓冲液、三蒸水、玻璃棒或搅拌容器、过滤器、RPMI 1640培养基干粉以及超净工作台; 3)消毒灭菌:对玻璃器皿我们要...
第一步,溶解干粉:首先将称量好的RPMI 1640培养基干粉按比例的添加到提前配制好的三蒸水中,使用玻璃棒或搅拌器进行搅拌从而使RPMI 1640培养基干粉充分溶解到三蒸水中; 第二步,添加补充物:在溶解的培养基中我们可以根据细胞的类型,根据需要添加氨基酸、无机盐、维生素、生长因子等营养成分; 第三步,添加添加剂:根据...
合成培养基的配制 1、将RPMI-1640粉袋竖立轻弹，使袋中干粉下沉，剪开袋口，将干粉倒入3,000mL三角瓶中；2、加入1,000mL去离子水，快速旋转摇动三角瓶，或用磁力搅拌器搅拌一定时间使干粉培养基充分溶解；3、称取3.7gNaHCO3、2.39gHEPEs加入三角瓶，快速旋转摇动充分溶解；4、在超净台中安装好灭菌过滤器，...
1、因RPMI1640中含有的谷氨酰胺半衰期短,只有1~3周,故新配制的培养基使用2周后,再使用时,应临时补加谷氨酰胺。补加办法: 1)100倍浓缩的谷氨酰胺液使用时加入培养液总体积的1/100。 2)100倍浓缩谷氨酰胺溶液(200mmol/L)的配制:2.9222g谷氨酰胺,加双馏水至100ml,充分搅拌溶解后,过滤除菌。分装小青瓶(每...
关于RPMI1640细胞培养液的配制 1) 配制培养基最好使用新制备的三蒸水。一般在试验前当天或前一天制备为好。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配制。 2) 制备培养基的器皿清洗要绝对干净,烤干后备用(滤器、滤膜、量筒、移液管及盛放培养基的小瓶等存放和转移培养基液体的器具都应进行灭菌)。
3、合成培养基(化学成分清楚) 三、RPMI1640培养基的配制 1、RPMI1640 10g 2、丙酮酸钠 0.11g 3、Hepes(羟乙基哌碃乙硫磺酸)5.925g 4、NaHCO3 2g 5、三蒸水 1000ml 电磁搅拌,过滤出菌,并进行无菌实验 四、过滤出菌 仪器:不锈钢正压滤器 材料:纤维素微孔虑膜 (0.22mm孔径) ...
调节pH值：通过通入CO2，加入6 mol/L盐酸调节至6.0，再加入NaHCO3调节至6.9。5. 定容：添加三蒸水至最终体积，完成定容。6. 过滤除菌：在超净工作台进行紫外消毒，过滤除菌，分装至无菌玻璃瓶中。最后，将瓶口封好，存放于4℃冰箱中。完成RPMI 1640培养基配制。欲了解更多信息，欢迎留言讨论。
RPMI 1640 培养基不含蛋白质、脂质或生长因子。因此,RPMI 1640 培养基需要添加剂,通常采用 10% 胎牛血清 (FBS)。RPMI 1640 培养基使用碳酸氢钠缓冲系统 (2.0 g/L),因此需要 5–10% CO2 环境来维持生理 pH 值。cGMP 生产和质量体系RPMI 1640 培养基在位于纽约格兰德岛的符合 cGMP 要求的工厂内生产。该工厂...
1. RPMI 1640培养基的配方 RPMI 1640培养基的主要成分包括以下几个方面:碳源、氮源、无机盐、维生素和生长因子等。其中碳源通常采用葡萄糖,作为细胞能量代谢和营养物质来源。氮源则包括多种氨基酸和蛋白质物质,为细胞提供合成DNA和蛋白质所需的原料。无机盐包括钾、钠、钙、镁、铁等元素,维持细胞的体内环境平衡。维生...