基础型，类似PCR，只是完成DNA扩增，用DNA胶观察结果或与CRISPR技术结合使用。荧光型，在基础型的基础上，引入荧光探针（Exo probe），类似荧光探针PCR。可以用荧光仪读荧光值。试纸型，在基础型的基础上，引入试纸探针（Nfo probe），可以用层析试纸条观察结果。经验分享：-荧光型试剂盒，可以读荧光数值，
在这种情况下,与侧流层析结合的RPA有着很大的应用前景。 《Malaria Journal》杂志今年三月份发表的一项研究中,研究人员将RPA基础反应、TwistAmp nfo探针和侧流层析结合起来,实现了疟原虫18S rRNA基因的高灵敏度快速检测。在38°C的条件下,只需要不到十分钟的扩增,...
1、在RPA系统中,添加特异性探针; 2、探针中引入四氢呋喃修饰位点,四氢呋喃修饰核苷酸在DNA聚合酶作用下,可以几乎100%效率实现DNA链延伸; 3、在四氢呋喃修饰位点的临近处偶链发光基团和淬灭基团; 4、当探针同靶序列结构形成双链DNA,Nfo在巡视过程中遇到四氢呋喃修饰位点则认为DNA出现损伤需要进行修复,故对探针上的...
RPA扩增的基础体系(TwistAmp® Basic)含有DNA扩增所需的所有试剂,我们只要准备好引物和模板就行。在这个基础体系中添入不同的酶和探针,可以实现多样化的RPA应用,比如RNA扩增检测和实时RPA检测等等。 RPA反应需要用多少引物? RPA基础反应每次需要480nM引物,TwistAmp® exo、TwistAmp® fpg和TwistAmp® nfo每次需要4...
nfo加入了核酶nfo,可以用“三明治法”进行终点检测,比如测流层析试纸条LFD。除此之外,RPA扩增还可以很简单的实现多重化。只需要增加引物/探针就可以一次性检测多个扩增产物。RPA分析的关键在于扩增引物和探针的设计。PCR引物多半是不适用的,因为RPA引物比一般PCR引物长,通常需要达到30-38个碱基。引物过短会降低重组...
RT-nfoRT-nfo常温恒温RNA快速扩增酶(核酸试纸条型),用于RNA扩增,试纸条检测 LFD一次性核酸检测试纸条/可视化核酸检测试纸条/横向流动试纸条LFD RPA是什么? 基本原理: 重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸...
《Malaria Journal》杂志今年三月份发表的一项研究中,研究人员将RPA基础反应、TwistAmp nfo探针和侧流层析结合起来,实现了疟原虫18S rRNA基因的高灵敏度快速检测。在38°C的条件下,只需要不到十分钟的扩增,就能检出含有四个疟原虫的样本。加上侧流层析的检测时间,整个流程总共只需要15分钟,而且肉眼可以直接看到检测结果...
《Malaria Journal》杂志今年三月份发表的一项研究中,研究人员将RPA基础反应、TwistAmp nfo探针和侧流层析结合起来,实现了疟原虫18S rRNA基因的高灵敏度快速检测。在38°C的条件下,只需要不到十分钟的扩增,就能检出含有四个疟原虫的样本。加上侧流层析的检测时间,整个流程总共只需要15分钟,而且肉眼可以直接看到检测结果...
在这个基础体系中添入不同的酶和探针,可以实现多样化的RPA应用,比如RNA扩增检测和实时RPA检测等等。 RPA***反应需要用多少引物? RPA基础反应每次需要480nM引物,TwistAmp® exo、TwistAmp® fpg和TwistAmp® nfo每次需要420nM引物。有时,稍微改动一下引物的用量可以提高其性能。对不同引物浓度进行测试(从200nM 到...