RPA-Cas12a是CRISPR-Cas系统中的一种变体,它利用Cas12a蛋白来实现基因编辑。Cas12a是一种RNA导向的DNA内切酶,它可以通过与CRISPR RNA(crRNA)相互作用来识别特定的DNA序列。在RPA-Cas12a系统中,首先需要设计合适的crRNA,使其与目标DNA序列特异性结合。一旦crRNA与目标DNA结合,Cas12a蛋白就会被激活,并在特定的位置切割...
rpacas12a采用无线射频技术,可以在一定范围内与设备进行通信。它由两部分组成,一部分是发射器,另一部分是接收器。发射器通常是一个手持设备,类似于一个遥控器,而接收器则是安装在需要控制的设备上。 首先,当我们按下发射器上的按钮时,按钮会产生一个特定的射频信号。这个信号经过编码后,通过天线发射出去。接收器接...
Crispr/cas系统和RPA技术的联合应用可实现对靶向基因的高效检测和修饰。其中Crispr/cas系统可引导修饰特定的基因,而RPA技术则可以实现在样本中定量检测靶向基因的扩增产物,从而实现快速高效的基因检测。 Crispr/cas酶 重组CRISPR-Cas9蛋白 重组CRISPR-Cas12a蛋白 重组CRISPR-LwaCas13a蛋白 LbuCas13a 核酸酶 AapCas12b 核...
一种基于RPA-Cas12a的检测食源性致病菌的方法.pdf,本发明公开了一种基于RPA‑Cas12a的检测食源性致病菌的方法,属于酶学及分子生物学技术领域。本发明公开了一种RPA结合Cas12a的典型食源性致病菌检测方法;通过反式切割动力学的研究,对CRISPR/Cas12a检测体系进行了完全的
1、发明目的:针对现有检测技术将rpa与crispr/cas12a联合用于ahpnd诊断的两步法操作不适用于poct且存在污染的风险,本发明提供了一种rpa-cas12a一锅法检测系统,本发明利用基于次优原间隔相邻基元(suboptimal protospacer adjacent motifs,spam)设计的特殊crrna并首次运用于肝胰腺坏死病系统,成功开发了一种rpa-crispr一锅法...
该论文首次构建了基于RPA-CRISPR/Cas12a系统的非洲猪瘟病毒(ASFV)比色-荧光双模式检测策略,通过构建新型磁珠-酶报告系统,结合RPA-CRISPR/Cas12a技术,实现了对ASFV基因的比色-荧光双模式精准检测。 该方法能实现对单拷贝病毒基因组检测,可用于便携式可视化诊断,且在临床样本应用中展现了良好的检测性能,为病毒感染的快速...
1.一种单管一步法rpa-cas12a/cas13a快速检测mrsa的系统,其特征在于,所述系统包括:rpa扩增引物对、crispr探针、crrna、cas12a/cas13a蛋白、buffer、t7聚合酶、ntp; 2.如权利要求1所述的单管一步法rpa-cas12a/cas13a快速检测mrsa的系统,其特征在于,所述meca-crrna的序列如seq id no:1所示。
核酸检测应用猫疱疹病毒1型(feline herpesvirus-1,FHV-1)为水痘病毒属的双链DNA包膜病毒,是引起猫上呼吸道感染的主要病原之一.本研究以重组聚合酶扩增(RPA),Cas12a反式酶切反应和侧流层析试纸条(LFD)显示技术为基础,旨在建立靶向FHV-1 TK基因的RPA-Cas12a-LFD快速可视化检测方法.根据FHV-1 TK基因的保守片段序列...
随后,链置换DNA聚合酶在单链模板上延伸,引物从而完成扩增过程。整个反应通常在37-42℃的恒温条件下进行,无需热循环仪,非常适合在现场条件下检测各种病原体。通过将反转录酶纳入反应,RPA也可以用来检测RNA靶标。可以使用多种方法来检测扩增的DNA,如终...
Cas13 因其可以高特异性地检测RNA单分子在诊断领域备受关注,尤其是近日来,张锋教授团队利用基于CRISPR的技术,开发了一种检测新冠病毒RNA的方法后,Cas13 的研究更加如火如荼。然而许多诊断应用的灵敏度都需要达到渺摩尔(attomolar, aM或者10-18M),nM级别的灵敏度还远不能满足诊断需求。为了进一步提高Cas13a检测系统的...