在IP-RP HPLC图谱中,从 LNP 中提取的mRNA得到的MP和LP保留时间与分离纯化得到的MP和LP组分保留时间相同。而当采用CE进行分析时,无法区分分离纯化得到的MP和LN组分。 为研究mRNA三级结构是否发挥作用,在室温环境下,采用分子排阻层析(SEC)对MP和LP组分进行分析。mRNA 分子广泛的分子内和分子间结构会导致一系列依赖于...
高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）叫高压液相色谱（high pressure liquid chromatography）、高速液相色谱（high speed liquid chromatography）、高离度液相色谱（high resolution liquid chromatography）等经典液相色谱基础于60代期引入气相色谱理论迅速发展起与经典液相色谱区别填料颗粒均...
一维使用亲和色谱方法,二维使用排阻色谱(SEC)、阳离子交换(CEX)或反相色谱串联质谱法可以评估抗体的滴度、关键结构特征比如聚集体、片段、电荷异质体、分子量、氨基酸序列和糖基化[1]。Yi Li[2]等人利用中心切割二维液相方法分析ADC药物中的未偶联小分子相关杂质,该方法的一维是排阻色谱(SEC),将ADC药物和未偶联小分...
分子筛hplc,又称为体积排阻色谱(size exclusionchromatograghy,sec),小分子量的化合物进入凝胶孔中,滞留时间长;大分子量的化合物不能进入孔中,会更早的被洗脱下来。分子筛色谱的优势在于能够处理至少1nmol的目的蛋白,并得到很好的分离效果,分离时间也很短,一般在3个小时以内,同时获得的层析分离峰也更小。sec进行蛋...
mRNA 分子广泛的分子内和分子间结构会导致一系列依赖于序列、盐和温度的结构,这些结构通常在 IP-RP HPLC 或 CE 条件下发生变性,但是,可通过天然条件下的SEC进行鉴定。在SEC图谱中,分离度MP 和 LP 峰保留时间与从 LNP 中提取的 mRNA 保留时间相同。这种现象说明RNA晚洗脱峰LP并非mRNA聚集体,其形成可能与额外的...
mRNA 分子广泛的分子内和分子间结构会导致一系列依赖于序列、盐和温度的结构,这些结构通常在 IP-RP HPLC 或 CE 条件下发生变性,但是,可通过天然条件下的SEC进行鉴定。在SEC图谱中,分离度MP 和 LP 峰保留时间与从 LNP 中提取的 mRNA 保留时间相同。这种现象说明RNA晚洗脱峰LP并非mRNA聚集体,其形成可能与额外的...
分子筛HPLC，又称为体积排阻色谱(size exclusion chromatograghy，SEC)，小分子量的化合物进入凝胶孔中，滞留时间长；大分子量的化合物不能进入孔中，会更早的被洗脱下来。分子筛色谱的优势在于能够处理至少1nmol的目的蛋白，并得到很好的分离效果，分离时间也很短，一般在3个小时以内，同时获得的层析分离峰也更小。...
图3. 抗体药Actemra的SEC-HPLC谱图 (点击查看大图) 根据目标峰的峰保留时间对2位6通阀进行阀切换。主峰选择7.0-7.5min时间段切到250 μL的loop环中,片段1选择7.5-8min时间段切到250 μL的loop环中,片段2选择8.7-9.2min时间段切到250 μL的loop环中。主峰的去卷积结果见图4,根据已知氨基酸序列进行数据处理...
实验结果表明，通过一维SEC-HPLC分析，Actemra样品的主峰含量为97.0%，片段1含量为2.0%，片段2含量为0.2%。主峰的去卷积结果显示，根据已知氨基酸序列进行数据处理，得到相应的分子量和糖型修饰信息。片段1的分子量约为100 KD，推测由两条重链组成，具体还需通过肽图进一步鉴定。片段1的去卷积结果显示...
虽然我不懂，但我们公司以前出现过这种状况，买了根离子柱，分开了，呵呵。