RNase H是指核糖核酸酶H,是一种核糖核酸内切酶,可以特异性地水解DNA-RNA杂合链中的RNA。RNase H不能水解单链或双链DNA或RNA中的磷酸二酯键,即不能消化单链或双链DNA或RNA。 应用: ●在cDNA第二链合成前去除mRNA ● DNA-RNA杂交体的鉴定 ...
RNase H酶在双链RNA:DNA杂交中切割RNA的磷酸二酯键,在切割位点的两端留下一个3'羟基和一个5'磷酸基团,具有双金属离子催化机制,其中两个二价阳离子,如Mg2+和Mn2+直接参与催化功能。根据氨基酸序列的不同,这些核糖核酸酶H分为1型和2型RNase H。1型RNase H有原核和真核核糖核酸酶H1和逆转录病毒核糖核酸酶H。
在分子克隆中，核糖核酸酶H的主要用途是与大肠杆菌DNA聚合酶工和DNA连接酶一起参加cDNA克隆中第二条DNA互补链的合成。当用逆转录酶以mRNA为模板合成cDNA第一链之后，用RNase H部分消化mRNA：DNA杂交分子中的RNA，产生的RNA片段就像冈崎片段一样，作为大肠杆菌DNA聚合酶T的引物，以cDNA第一链为模板合成DNA，直到把...
2. RNaseH酶的作用 RNaseH酶的作用是切割RNA-DNA杂交化合物中的RNA部分。在逆转录过程中,RNA-DNA杂交化合物形成后,RNaseH酶便开始作用,水解RNA-DNA杂交化合物中的RNA链,从而最终转移成为DNA-DNA双链。 3. RNaseH酶的水解机制 RNaseH酶的水解机制分为两个步骤: 第一步是活性中心的形成。当RNaseH酶与RNA-DNA...
核糖核酸酶H(RNase H)是一种核糖核酸内切酶,它能够特异性地降解杂交到DNA链上的RNA磷酸二酯键,故能降解RNA/DNA杂交链中的RNA链。该酶不能消化单链或双链DNA。该RNase H酶广泛用于除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A)或除去cDNA第二链合成时mRNA。1单位指50μL反应体系中,37℃条件下,20min内水解出1nmol...
RNASEH是一种重要的内切酶,在细胞内起着重要的调节DNA合成和修复功能的作用。RNASEH可将RNA/DNA双链分解成一条RNA和一条DNA单链,从而参与DNA的修复和转录过程。在基因工程领域,RNASEH重组蛋白的研究具有重要的应用前景。目录号 PA1000-8527 RNASEH重组蛋白是通过基因工程技术将RNASEH基因克隆到适当的载体中,在表达...
一、自然界中RNase 的作用 真核生物、古细菌和细菌中至少存在 21 种类型的 RNA 酶,它们在机体中发挥着重要的作用。比如: RNase H具有去除 DNA 复制中的 RNA 引物的作用。 RNase P具有处理 tRNA 分子的功能。 RNase A主要负责清除不再需要的细胞 RNA,这些 RNA 由生物机体内的某些细胞大量分泌。 RNase L是人体...
RNase H是一种核糖核酸内切酶,能够特异性地降解杂交到DNA链上的RNA磷酸二酯键,故能降解RNA/DNA杂交链中的RNA链; 该酶不能消化单链或双链RNA或DNA。 RNase H的应用 除去杂交到 poly(dT) 上的 mRNA poly(A); 在cDNA 第二链合成时除去 mRNA ;