行名是基因名,logFC(log2 fold change)是两组之间差异表达的倍数,使用log2处理过。AveExpr是基因在所有样本中的平均表达量,t是用于t-test的,可以衡量组间差异显著性,P.value就是P值,adj.P.Val是校正过的P值,这里我用的是“BH”方法进行的校正。B是表示基因表达差异的贝叶斯统计量。这里我们基本上只用到logF...
(9)基因差异表达计算 可参考说明文件:https://bioconductor.org/packages/release/bioc/vignettes/DESeq2/inst/doc/DESeq2.html 1.执行命令R 进入R环境,并读取差异表达分析包 DESeq2 Rlibrary(DESeq2) 2.读取短片段比对的基因计数文件 AP53_counts.txt 和归一化因子文件 AP53_rpkmFactor.txt,并查看其内容 cu...
使用DESeq2进行差异表达分析涉及多个步骤,如下面的蓝色流程图所示。简单地说,DESeq2将对原始计数进行建模,使用标准化因子(大小因子)来解释库深度的差异。然后,它将估计基因的散度,并缩小这些估计,以产生更准确的分散估计,以建立计数模型。最后,DESeq2将拟合负二项模型,并使用Wald检验或似然比检验进行假设检验。 img...
如前所述,尽管单细胞数据包含技术噪声伪影,例如丢失、零膨胀和高细胞间变异性, 与专门为scRNA-seq数据设计的方法相比,为批量RNA-seq数据设计的方法表现良好。发现单细胞特异性方法特别容易将高表达基因错误地标记为差异表达。 在本篇中,我们演示如何使用两种工具进行差异表达分析:具有拟似然检验的edgeR和具有随机效应的...
Bulk RNA-seq 分析的一个重要任务是分析差异表达基因,我们可以用omicverse包 来完成这个任务。对于差异表达分析而言,首先,我们可以先将 gene_id 改为 gene_name。其次,当我们的数据集存在批量效应时,我们可以使用 DEseq2的 SizeFactor 对其进行归一化,并使用 wilcoxon 的 t 检验来计算基因的 p 值。在这里,我们...
本文以从NCBI SRA下载的开源RNA-seq数据为例,演示基于 tophat2 和 cufflinks 的基因表达量差异分析。 Part.1 SRA数据下载与表达量分析所需软件下载安装 SRA数据简介 随着高通量测序的发展,测序价格不断下降,测序通量也不断提高,使很多实验室,可以获得大批量的数据,但是...
【1】Bulk RNA-seq和scRNA-seq数据收集与预处理 文献解读 TCGA、GEO公共数据下载 差异表达基因分析 富集分析 【翰佰尔生物】, 视频播放量 2325、弹幕量 0、点赞数 93、投硬币枚数 47、收藏人数 356、转发人数 30, 视频作者 翰佰尔生物, 作者简介 官网:henbio.com/tools |
RNA-seq差异表达基因蛋白质相互作用网络RNA-Seq已成为当前转录组学研究的强有力工具,尤其在肿瘤差异表达基因的筛选方面有重要的应用价值.为进一步阐明肝细胞癌(HCC)的分子机制,本研究对GEO中1个包括12对HCC组织标本的RNA-Seq数据集(GSE63863)进行了生物信息学分析.采用edgeR,DESeq2,voom等3种不同算法的软件进行...
转录组测序是最常用的组学实验,对全谱基因定量,找到差异表达基因。RNAseq涉及到原始数据,数据质控,基因组比对,差异基因鉴定,差异基因功能富集分析,重要基因如转录因子激酶的靶基因预测等,我们用10讲的时间,…
我始终推荐使用基于count数据的差异表达分析流程（比如edgeR、limma、DESeq2之类的）。这些流程里会对测序...