首先,使用如FastQC等工具对原始的RNA-Seq数据(通常是FASTQ格式)进行质量控制检查。根据质量控制的结果,可能需要对数据进行修剪,去除低质量的序列或接头序列。可以使用Trimmomatic或Cutadapt等工具进行这一步。2 读段比对:将清理后的读段(reads)比对到参考基因组上。可以使用STAR、HISAT
加载演示数据TCGA-UCS-STARdata.Rdata ,该数据来自TCGA数据库,TCGA数据库里面可以直接获取TPM的数据,这里我们自己用count转换后和下载的数据进行比较,看看转换有没有差异。 代码语言:javascript 代码运行次数:0 运行 AI代码解释 ### 加载RNAseq数据load("TCGA-UCS-STARdata.Rdata")count=STARdata[["count"]]tpm=...
trim_galore -output_dir clean --paired --length 75 --quality 25 --stringency 5 seq_1.fasq.gz seq_2.fastq.gz 处理需要花上一定时间和磁盘空间。得到处理后数据 2. 整理后数据的质量分析。 对过滤后对文件进行质量分析。观察过滤结果。同样使用fastqc和multiqc两个软件进行质量分析。得到结果如下: ENCF...
到此,我们完成了RNAseq原始数据的下载、格式转化和质控清洗步骤,得到了经过质控后存放于clean文件夹下的fastq文件,接下来就可以利用这些cleaned fastq文件进行下一步的比对、计数(hisat2+feature_counts 或 salmon),最终得到我们想要的counts文件 参考资料 20160410 测序分析——使用 FastQC 做质控 - 知乎 (zhihu.com)...
组装过程中,需要根据数据特点选择合适的算法和参数。 4.基因定量:使用featureCounts、HTSeq等工具对比对到基因组上的reads进行基因定量,计算每个基因的表达量。定量结果可以以counts或RPKM/FPKM等形式表示。 5.差异表达分析:使用DESeq2、edgeR等工具对不同样本之间的基因表达差异进行分析,筛选出差异表达基因。差异表达...
一般来说,fastq 文件是使用质量控制工具(如 FastQC)进行预处理的。这将输出一系列评估序列 reads 质量的指标。⚠️但是fastq文件不一定是 单细胞 RNA-SeqFASTQ 文件是一种通用的测序数据格式,广泛应用于各种类型的测序实验,包括但不限于: 常规的 RNA-Seq(转录组测序) DNA-Seq(基因组测序) ChIP-Seq(染色质...
RNA-Seq是一种基于高通量测序技术的转录组学研究方法,通过对生物样品中所有RNA分子进行测序,从而获得基因表达的全面信息。今天,我们来详细讲解RNA-Seq的原理和应用。🔍 什么是RNA-Seq? RNA-Seq,即RNA测序技术,也称为转录组测序技术,是一种通过观察基因表达来分析整个基因组的技术。主要测序对象包括信使RNA(mRNA)、...
rnaseq 数据处理流程 rnaseq数据处理流程 RNA-seq数据处理流程主要包括以下步骤:1.**原始数据质控**:检查测序数据的质量,包括读取长度、测序深度、质量分数分布等。2.**数据清理和去噪**:去除低质量的序列、去除包含的杂质和噪音数据。3.**序列比对**:将清洁后的序列与参考基因组进行比对,得到每个序列在基因...
一、RNAseq数据分析流程: 一、电脑的要求: 数据分析最好是有mac或者linux系统,8G+的内存,500G的存储即可。 如果你是Windows,那么安装必须安装 finashell,git,notepad++,everything,还有虚拟机服务器,在虚拟机里面安装linux,最好是ubuntu。全程如下界面操作: ...