This approach provided consistent RNA yields and sensitive viral detection relative to two commercial extraction kits (QIAGEN RNeasy Mini Kit and MACHEREY–NAGEL NucleoSpin RNA Plus Kit). The incorporation of a user-friendly and non-spiking-based RT-qPCR internal control designed for the 18S rRNA ...
(2012) Evaluation of RNA extraction methods and identification of putative reference genes for real-time quantitative polymerase chain reaction expression studies... A Nonis,A Vezzaro,B Ruperti - 《Journal of Agricultural & Food Chemistry》 被引量: 33发表: 2012年 Identification of Reference Genes ...
3. Filter the resulting slurry through four layers of Miracloth in a funnel to a 50 ml conical tube and centrifuge at 850× gfor 5 min at 4°C to pellet cell debris. 4. Transfer the supernatant to a new 50 ml tube and add 5 ml of RG lysis buffer. 5. Centrifuge at 4,000× gf...
Genetic transformation of A. thaliana and salt treatment Subcellular localization of GhBGLU24-A Y2H、LCI、BiFC、RNA extraction and RT-qPCR Salt and DTT stress treatment、Transient expression assay Histochemical GUS staining and fluorimetric GUS assays 03 主要结果 3.1GhBGLU24-A负调控植物耐盐性 在我们...
RNA extraction and RT-qPCR for detection of miRNA Total RNA was extracted from MCF-7 cancer cells by using the RNA extraction kit from GenePharma (Suzhou, China). Next, the cDNA was synthesized from the extracted total RNA using the miRCURY LNA RT Kit (Qiagen). Briefly, a reverse transcrip...
●操作安全性高:使用RNA Extraction Agent替代了氯仿。 ●应用范围广:适用于小量样品 (50-100 mg组织、5×106细胞),也可用大量样品(≥1 g组织或≥107细胞),对人、动物、植物、血液和细菌组织提取都适用。 ●提取速度快:一个小时内可完成反应。 ●操作可视化:溶液呈粉红色,便于分离水相和有机相。
使用PureLink RNA 小量提取试剂盒从组织培养细胞中纯化的 RNA 随即便可进行 RT-PCR 及后续使用金标准 Applied Biosystems TaqMan 基因表达检测进行的 qPCR 下游分析。使用 PureLink RNA 小量提取试剂盒分离的 RNA 进行基因表达分析 qPCR 的流程示例 图1。 图1.PureLink RNA...
5.实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)验证小RNA表达:使用RNAiso for Small RNA小RNA提取试剂盒(日本Takara)根据参考文献[15]对精子细胞中的小RNA进行提取,提取的RNA立即转移至-80 ℃保存...
由于提取试剂盒的缺乏和通量比较低,RNA的提取成为病毒检测的瓶颈。因此,张锋实验室开发了一个一步到位,不需要离心,5分钟内可以完成的方法。该方法可以直接跟CDC的RT-qPCR方案联合使用,提高检测通量和降低试剂供应链断裂造成的影响。 试剂: Lucigen的QuickExtract DNA Extraction Solution(QE09050,以下简称QE)融化后,分...
NanoDrop™ One/OneC内置的Acclaro™智能污染物鉴定技术可准确测定出RNA样品中的蛋白质和残留的提取试剂(包括苯酚)等污染物4,并自动校准给出真实核酸样本浓度,保证科研工作者得到准确的RT-qPCR实验结果。 RT-qPCR是分子生物学一项常规的实验技术,用于基因表达定量等各种应用。MIQE(Minimum Information for Publication...