如果初始RNA溶液的离子浓度较高,建议使用TE缓冲液进行稀释。 单个样品最终体积建议不超过400微升。 确保全程使用RNase-free的水、枪头和EP管。 对于低浓度或碎片化的RNA,可以加入少量的glycogen帮助沉淀。 🍶【第二步:乙醇沉淀】 加入2.5-3倍体积的无水乙醇并混合均匀。在-20或-80℃环境中静置。 静置时间和温度...
利用氯化锂(LiCl)沉淀纯化RNA 氯化锂(LiCl)常用于沉淀RNA,乙醇和单价阳离子 (如钠或铵离子) 沉淀则使用更普遍。氯化锂(LiCl)沉淀法较其他RNA沉淀方法具有较大的优势,其沉淀DNA、蛋白质或碳水化合物的效率更高 (Barlow et al., 1963)。 采用该方法可以去除RNA沉淀...
LiCl沉淀较其他RNA沉淀方法具有较大的优势,其沉淀DNA、蛋白质或碳水化合物的效率更高 (Barlow et al., 1963)。 采用该方法可以去除RNA沉淀中的翻译或cDNA合成抑制剂 (Cathala et al., 1983).。 它还提供了一种简单快速地回收体外转录反应中的RNA的方法。 氯化锂的一个主要优点是它不会有效地沉淀蛋白质或DNA。
(1)向待纯化的RNA产物中加入2.5 M的氯化锂(LiCL)。 (2)混匀后于-20℃沉淀30min。 (3)4℃,13000g离心15min,弃去上清。 (4)用75%的乙醇洗一遍,4℃,13000g离心15min。 (5)弃去上清,小心地吸干溶液,放在通风处让乙醇挥发。 (6)加入20uL的RNAse-free ddH2O重悬RNA,测浓度。 LiCL纯化RNA(Emilie Viennois...
RNA以rRNA的数量最多(80-85%),tRNA 及核内小分子RNA占10%-15%,而mRNA 分子只占1%-5%。mRNA 分子大小不一,序列各异。 RNA提取一般使用蛋白质强变性剂有效抑制RNA酶活性,同时并使DNA变性,再通过有机溶剂反复抽提去掉蛋白质、多糖等物质,在RNA沉淀剂的作用下,针对性分离出RNA。 总RNA提取原则: 保持核酸结构的...
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动物RNA纯化试剂(沉淀法,TRIzol) 价格￥790 起批量≥1瓶 最小起订1瓶 供货总量999瓶 发货地址湖北省武汉市 建议售价￥790/瓶 更新日期2025年02月21日 产品规格250mL 即时洽谈立即询价查看联系方式 收藏产品发送留言 VIP1年 湖北艾普蒂生物工程有限公司 ...
植物RNA的分离纯化LiCl沉淀法 二、仪器设备高速冷冻离心机、电子天平、冰箱 三、材料及试剂1.材料：植物任何部分的新鲜组织2.试剂：①水饱和酚(pH4.9)；②苯酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)混合溶液；③3mol/LNaAc(pH5.2)；④RNA提取缓冲液：内含0.2mol/LTris-HCl(pH8.0)、0.4mol/LLiCl、25mmol/LEDTA和1%...
醋酸钠乙醇沉淀法核酸纯化实验 核糖核酸(缩写为RNA,即Ribonucleic Acid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A(腺嘌呤)、G(鸟嘌呤)、C(胞嘧啶)、U(尿嘧啶),其中,U(尿嘧啶)...
与核酸提取相比,DNA 和 RNA 纯化不包括任何破坏细胞膜和释放核酸的裂解步骤。 相反,它涉及您的样品的清理,例如 有效去除所有在 PCR 过程中用于促进目标序列扩增的成分。 1. 乙醇和异丙醇沉淀 我们将仔细研究的第一种纯化方法是乙醇和异丙醇沉淀。这是纯化基因组 DNA 的首选方法,可用于在 CsCl 密度梯度离心与 Eth...