RNA干扰通过转录靶向mRNA序列的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)或微小RNA(microRNA,miRNA)来诱导基因特异性的沉默。在进行RNA干扰研究时,靶点的选择和设计是至关重要的一步,它决定了干扰效果的专一性和效率。本文将重点介绍RNA干扰技术靶点的设计原则及其专一沉默效应的分析。 RNA干扰技术的靶点设计主要包括两个...
摘要: 目的:设计并筛选针对人STAT1基因有效的RNA干扰靶点.方法:根据人STAT1基因序列,设计3个干扰序列,将oligo退火成双链并连接穿梭载体pLKO-1-EGFP-puro-shRNA,构建shRNA慢病毒载体质粒,并转化至感受态细胞DH5a,进行测序验证.在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产慢病毒.慢病毒载体... 查看全部>> ...
一个设计是,PPI的概念,搞砸衣壳蛋白的结合面,让病毒无法组装。毕竟,这个靶点的好处,是热力学要求很高,既要组装成病毒粒子,也不可以结合太牢固,导致无法脱去衣壳蛋白。干扰病毒组装,还是粘得牢固,让病毒无法脱壳,都是比较要命的。另外,是衣壳蛋白的p6结构,要是干扰RNA亲和,会导致病毒形成空心粒子。一个是基因敲除,...
人VEGF基因慢病毒介导RNA干扰有效靶点的设计及筛选