RIP-qPCR的计算公式是△△Ct法,首先需要设定一个对照组(比如正常组)和实验组(比如处理组),对照组和处理组分别进行RIP实验和qPCR检测。然后通过比较两组的Ct值,可以得出△Ct值,再通过比较处理组和对照组的△Ct值,可以得出△△Ct值。最后通过比较不同样本的△△Ct值,可以得出它们之间的相对表达量。 具体来说,假...
- 通过qPCR验证RNA结合的特异性。8. **数据处理**:- 使用ΔΔCt法计算结合效率,计算示例包括输入量的百分比计算。实验结果包括Western检测结果验证目的蛋白表达,qPCR原始数据及处理结果,柱状图展示阳性对照和阴性对照实验,说明目的蛋白能特异性结合靶标RNA。
RNA Immunoprecipitation (RIP)是研究细胞内RNA与蛋白结合的一种实验技术,运用针对目标蛋白的抗体,把目的蛋白以及与之结合的RNA沉淀下来,经过分离纯化就可以对复合物中的RNA进行 Microarray(RIP-chip),定量qPCR或高通量测序(RIP-Seq)检测分析。本试剂包含RIP实验所需的全套试剂,以及RIP产物的提取试剂,让实验更加轻松快捷...
如果对照的目的是保证两个样品间加入的细胞量一致或者进行定量,理论上说,使用input作为判别,计算不同样品上样量的差异。如果对照的目的是为了看IgG以及目的抗体富集的非特异性mRNA的量的话,那么可以找一个确定不会与目的抗体结合的RNA片段设计primer进行qPCR,用来看IgG以及目的抗体拉下来的背景情况。RIP可以看成是普遍...
RNA Immunoprecipitation (RIP)是研究细胞内RNA与蛋白结合的一种实验技术,运用针对目标蛋白的抗体,把目的蛋白以及与之结合的RNA沉淀下来,经过分离纯化就可以对复合物中的RNA进行 Microarray(RIP-chip),定量qPCR或高通量测序(RIP-Seq)检测分析。本试剂包含RIP实验所需的全套试剂,以及RIP产物的提取试剂,让实验更加轻松快捷...