基因工程化的AAV能转导外源基因，借助特定启动子、光遗传学/化学遗传学元件、钙指示剂、神经递质探针或Cre/lox P，Flp／FRT重组酶技术，可选择性地标记特定的神经元。越来越多的神经环路研究使用AAV作为神经示踪工具。AAV血清型种类多，不同的血清型对神经元有不同的感染特性。神经科学研究中常用的 AAV 血清型有 ...
基因工程化的AAV能转导外源基因,借助特定启动子、光遗传学/化学遗传学元件、钙指示剂、神经递质探针或Cre/lox P,Flp/FRT重组酶技术,可选择性地标记特定的神经元。越来越多的神经环路研究使用AAV作为神经示踪工具。 AAV血清型种类多,不同的血清型对神经元有不同的感染特性。神经科学研究中常用的 AAV 血清型有 2...
AAV9-Retro不仅具有与AAV2-Retro相当的逆行转导效率，还保留了AAV9血清型跨血脑屏障的特性。成年小鼠尾静脉注射AAV9-Retro-EGFP后，在皮层、纹状体、苍白、海马体、丘脑、下丘脑等重要的脑区均有荧光信号，且其转导效率与AAV9血清型相当。因此，AAV9-Retro用于外周递送基因进行上行标记具有更大的潜力。AAV9-Retro...
重磅新品 | 外周逆向示踪新血清型——AAV9-Retro 高效逆行或高效跨血脑屏障转导神经元的腺相关病毒(AAV)是研究神经环路结构和功能以及治疗脑部疾病的强大病毒载体工具之一。然而,同时具有这两个重要特征的AAV还未见报告。2020年10月14日,中科院深圳先进院徐富强团队在Mol Brain杂志发表题为“AAV9-Retro mediates effic...
文章中运用具有逆行标记效率的AAV9-Retro血清型为病毒载体工具,利用Cre/Flp-LoxP重组酶系统的策略,通过在脊髓注射AAV-EGFP来标记小鼠大脑中的脊髓投射神经元(图3)。同时团队利用光遗传学、钙成像等方法激活麻醉状态下小鼠的兴奋性或者抑制性的脊髓投射神经元,发现rVMM的兴奋性脊髓投射神经元能同时产生骨骼肌收缩,以及...
rAAV11除了具有高效率的反向示踪功能外,还具有多种功能单元(如Cre重组酶、Cre敏感的功能性分子),可实现对神经元活性的实时监控。更重要的是,rAAV11还具有对星形胶质细胞的高特异性、高效率的靶向性。 因此,rAAV11在基因治疗,神经环路结构与功能解析,以及神经退行性疾病的神经环路机制等方面有着广泛的应用。
除了能逆向标记广泛的神经通路,如皮层/丘脑/杏仁核至纹状体的投射通路,丘脑/海马/内嗅皮层至前额叶的投射通路等,rAAV2-retro还展现了优秀的携带基因工具的能力。原文作者成功验证了rAAV2-retro与Cre-LoxP系统、钙离子成像技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术的结合(图4-5)。
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